蛋白质分离纯化-基础医学实验探究.pptVIP

一实验项目 蛋白质的盐析与透析 凝胶过滤法分离Hb与核黄素 （一）蛋白质的盐析与透析 盐析实验原理: 在溶液中加入中性盐使生物大分子沉淀析出的过程称为“盐析”。 蛋白质溶液为亲水溶胶体系，其稳定因素：水化膜和电荷。 加入大量中性盐后，夺走了水分子，破坏了水膜，暴露出疏水区域，同时又中和了电荷，破坏了亲水溶胶，蛋白质分子即形成沉淀。 蛋白质的盐析与透析-原理 蛋白质的盐析与透析-原理 　　不同的蛋白质分子，由于其分子表面的极性基团的种类、数目以及排布的不同，其水化层厚度不同，故盐析所需要的盐浓度也不一样，因此调节蛋白质的中盐浓度，可以使不同的蛋白质分别沉淀。 蛋白质的盐析与透析-实验操作 盐析 　　　　　　　血清1ml   　　 逐渐加入饱和(NH4)2SO4 溶液１ml ，边加边搅拌。  　离心 ３０００rpm 10分钟  　 　　　上清 　　沉淀（球蛋白） 逐渐加入固体 (NH4)2SO4 １％HCl 1-2滴 离心５分钟 沉淀（清蛋白） 透析实验原理: 蛋白质是大分子物质，