2 细胞的分离和破碎课件.ppt

2 杂蛋白质的除去 (1) 沉淀法 盐析 调节pH→pI (2) 吸附法 加入吸附剂或沉淀剂 (3) 变性法 加热，大幅度调节pH，加有机溶剂或表面活性剂等。 向胶体悬浮液中加入电解质，由于双电层电位降低，使胶体体系不稳定，胶体粒子间因相互碰撞而产生凝集（1mm左右）的现象。 常用的凝聚剂有：Al2(SO4)3.18H2O，AlCl3.6H2O，FeCl3，ZnSO4，MgCO3 胶体双电层的构造 絮凝 指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大（10mm）的絮凝团的过程。 根据活性基团在水中解离情况的不同，絮凝剂可分为非离子型、阴离子型和阳离子型三类。 根据其来源的不同，工业上使用的絮凝剂又可分为如下三类： (1)有机高分子聚合物，如聚丙烯酰胺类衍生物。 (2)无机高分子聚合物。 (3)天然有机高分子絮凝剂。 絮凝效果与絮凝剂的分子量和类型、加量，溶液的pH，搅拌速度和时间等因素有关。 3. 有色物质的去除及其他 1）使用吸附剂去除有色物质 离子交换剂、离子交换纤维、活性炭等 2）用工业酶制剂可净化发酵产物，除去干扰性浑浊物 淀粉酶：不溶性多糖 单糖 3) 使用惰性助滤剂 硅藻土、纸浆、珍珠岩等 4）加入反应剂 环丝氨酸发酵液用CaO和H3PO4处理 2.2 固 液 分 离 一、 发酵液的过滤特性和滤饼的重量比阻rB 发酵液：高粘度，非牛顿流体， 滤饼可压缩。 　滤饼的重量比阻rB：表示单位滤饼厚度的阻力系数，是衡量过滤特性的主要指标。 对于不可压缩滤饼，比阻值为常数， 但对于可压缩滤饼，rB=f（p）。 如忽略过滤介质的阻力，恒压下的过滤速率方程式为： q— 到瞬间τ，通过单位过滤面积的滤液量，m3/m2； ⊿p —操作压差，Pa； τ —过滤时间，s； μ — 滤液黏度，Pa.s; rB — 滤饼的重量比阻,m/kg; XB — 通过单位体积滤液所形成的滤饼干重,kg/m3; 在不同时间τ测定滤液量,根据过滤面积就可得q 值。以q为横轴，τ /q为纵轴作图，所得直线获得斜率（M）。 二、影响过滤速度的因素 菌种 真菌易过滤；放线菌过滤较困难，需预处理；细菌过滤十分困难，絮凝预处理。 培养基组成 发酵终止时间 三、固-液分离设备 板框式压滤机 国内广泛采用 优点：结构简单、价格低廉、过滤面积大。 缺点：不能连续操作、劳动强度大、滤液澄清度不高。 2. 鼓式真空过滤机 主要用于霉菌发酵液的过滤 优点： 能连续操作，实现自动化控制，适用于处 理量大而固体含量较多的滤浆。 缺点：压差较小，不适用于滤饼阻力较大的物料。 3. 错流过滤 是一种新的过滤方式，与常规过滤的区别在于它的固体悬浮液流动方向与过滤介质平行 。 优点：过滤速度快 缺点：固液相的分离不太完全 错流过滤模式 4. 离心分离设备 A 离心分离法 1）差速离心 生化工业最常用的方法 2）区带离心 生化研究 分为差速区带离心和平衡区带离心 用于核酸、蛋白质的分离纯化 B 离心分离设备 1）管式离心机 2）碟片式离心机 3）三相倾斜式离心机 含固量较多的发酵液 离子交换剂、离子交换纤维: 甘蔗制糖工业生产中糖汁的脱色 板框式压滤机：典型的间歇操作加压过滤设备，适用于各种悬浮液的固液分离。广泛应用在化工、石油、制药、食品、轻工、洗煤、燃料和冶金等行业，也适用于纺织、印染、皮革、造纸等环境污水处理过程。是一种理想的固液分离设备。 板框式压滤机主要由止推板(固定滤板)、压紧板(活动滤板)、滤板和滤框、横梁(扁铁架)、过滤介质(滤布或滤纸等)、压紧装置、集液槽等组成。 圆锥形螺旋与圆柱形转鼓同向转速差 细胞破碎:选用物理、化学或机械的方法来破坏细胞壁或细胞膜。 2.3 细 胞 破 碎 2.3.1 细胞