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病理技术论文：微波在病理技术中的应用 [摘要]目的探讨微波在病理特殊染色中的应用。方法对我院200例各类标本利用微波染色法进行病理染色，分析其结果。结果经过微波进行脱水后组织切片具有组织结构清晰，切片厚薄、染色均匀、背景无气泡、颜色鲜艳、细胞变形小、切片完整等特点，对比度好，无脱片现象，并可明显缩短整个制片过程。甲级片率在50%以上，没有丙级切片。结论本方法节省时间、染色效果稳定可靠、操作简便的特点，适合在病理科，尤其是基层单位开展。 [关键词]微波；病理；特殊染色 随着临床对病理报告及时性的要求越来越高，目前有许多病理实验室在尝试将病理报告周期由原来3d缩短到1d。传统的化学染色费时、脱片率高，尤其一部分抗原暴露不佳者，染色效果不稳定。以上这些都大大影响临床病理诊断的准确率。微波辐射技术在组织病理学上的应用已越来越广泛，它与常规方法比较，操作简便、省时快速，为越来越多的病理学工作者所青睐。我院于2005年6月～2008年6月利用微波在病理特殊染色中应用，取得了良好效果，现报道如下。 1资料与方法 1.1一般资料 提取我院各类标本200例，涉及的组织部位有皮肤、肌肉、淋巴结、肺、胃、肠、肝、肾、乳腺、宫颈、子宫内膜、子宫肌瘤、输卵管、卵巢等各类组织，组织块大小可为2.5cm×1.5cm×0.2cm、2.0cm×1.5cm×0.2cm或1.0cm×1.0cm×0.2cm，钙化组织取材时应避开。 1.2仪器及方法 选用微波炉为YWY781B型，输出功率为80～700W，分5档，实验采用中高档。标本经：（1）固定：固定-脱水混合液（40%甲醛10mL，95%酒精85mL和冰醋酸5mL）中档微波处理5min后；（2）脱水：放入盛有纯丙酮10mL的微波专用容器里中档微波照射5min×4，每次更换新液；（3）透明：用二甲苯浸泡5min；（4）浸蜡包埋：65℃石蜡浸泡5min后取出包埋，切片，厚4μm。试剂为常规HE、各类特殊染色所用试剂。切片平放在湿盒中的架子上，滴苏木素染液覆盖组织，中高档微波照射40s，水洗，常规方法染伊红，脱水封片。 2结果 经过微波进行脱水后组织切片具有组织结构清晰，切片厚薄、染色均匀、背景无气泡、颜色鲜艳、细胞变形小、切片完整等特点，对比度好，无脱片现象，并可明显缩短整个制片过程。甲级片率在50%以上，没有丙级切片。见封三图7、8。 3讨论 组织标本需经固定、脱水、透明、浸蜡等程序后才能进行石蜡包埋切片，普通情况下需时15～20h。染色过程时间过长，直接导致脱片率变高。有些患者在手术过程中需进行快速病理诊断，以决定手术的方式和范围。冷冻切片是目前最常用的快速切片方法，但冷冻切片机价格较高，同时还需要冷冻包埋剂，切片费用也相应较高。 微波是一种高频电磁波，频率为30～30000MHz，波长在1～10000mm之间，可以显著提高分子的运动速度，带动极性分子彼此之间作180度的超高速震动，分子间的相互碰撞产生均匀一致的摩擦热，而使组织细胞的化学反应加速，增加细胞的渗透性和溶剂分子的穿透力，促进了试剂在组织内的化学扩散。低强度微波范围内可以很快地影响疏水性相互作用，氢键和范德华力促使抗原抗体分子牢固结合。20世纪70年代初，国外就有学者尝试在组织固定过程中利用微波进行组织处理。随着微波技术在病理领域的应用越来越广泛，目前已在组织处理、组织化学染色、免疫组化抗原修复、电镜制样等方面得到应用[1]。微波技术主要是根据微波能发射高频能量，组织经微波辐射后会加速内部分子间的相互碰撞，加快组织固定、脱水等过程，使溶剂分子更快进入组织内部，提高染色质量，达到快速处理组织的目的，使病理技术工作的效率大大提高。应用微波的热效应和高频电磁波作用，使某些被封闭的抗原决定簇得以重新暴露，并打开蛋白质间交联键，使标记敏感性明显提高。微波可很好地保护组织结构和细胞形态，克服了常规染色法中温度高、时间长和组织易收缩、脱片等现象。 我们在实际应用中，认为微波辐射比较适用于病理组织特殊染色中，在组织特殊染色过程中应用微波照射，将大大缩短反应时间，从而加快了组织特殊染色过程。无论是石蜡切片还是树脂包埋切片的特殊染色，都能在微波作用下加速。微波除了能大大减少染色时间外，还可减少切片的非特异性沉淀，从而使得染色背景变得干净。而且效果好，易掌握，对急性、疑难病例也有较大的定性价值。另外对病原体染色时，用640W的微波照射30～60s，还能起到杀死病原体的作用，从而减少对人的污染[2]。本次实验结果表明，微波特殊染色，从各个方面都优于未经微波处理的切片。但在应用微波的过程中也要严格控制微波的温度，因为温度过高会破坏抗体，影响标记效果。同时由于各器官组织材料自身特点不一，电子密度也不完全相同，使用的时间也不完全相同，笔者认为时间以15～20min为宜，不可超过25