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基础点
1 植物组织培养的基本过程
试管苗植物体
2 菊花组织培养过程
(1)影响植物组织培养的主要因素
①选材:一般选择未开花植株的茎上部新生的侧枝。
②营养供应
(2)实验操作过程
制备MS固体培养基:配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌
↓
外植体消毒:→→→
↓
接种:始终在酒精灯火焰旁进行,对接种工具要用火焰灼烧灭菌。将菊花茎段插入培养基中时注意不要倒插。
↓
培养与移栽:在18~22 ℃的无菌箱中培养,得到试管苗后进行移栽
3 月季的花药培养
(1)花粉发育过程:花粉母细胞(小孢子母细胞)→四分体时期→单核期→双核期→花粉粒。
(2)影响花药培养的因素:主要因素是材料的选择和培养基的组成。花药培养一般选择在初花期,选择的花粉处于发育过程中的单核期。
(3)实验操作关键
①材料的选取:挑选完全未开放的花蕾,确定花粉发育时期最常用方法是醋酸洋红法。
②接种:灭菌后的花蕾,在无菌条件下除去萼片和花瓣,并立即将花药接种到培养基上。剥离花药时尽量不要损伤花药。
③培养:温度控制在25 ℃左右,幼小植株形成后才需要光照。如果花药开裂释放出胚状体,就要在花药开裂后尽快将幼小植株分开。
重难点
1 MS培养基(植物组织培养用的培养基)的成分及各成分的作用
成分 作用 微量元素和大量元素 提供植物细胞生活所必需的无机盐 蔗糖 提供碳源,维持细胞渗透压 甘氨酸、维生素、烟酸、肌醇 满足离体植物细胞在正常代谢途径受一定影响后所产生的特殊营养需求 2 菊花茎与月季花药组织培养的比较
菊花茎的组织培养 月季花药组织培养 理论依据 植物细胞的全能性 植物细胞的全能性 材料选取 未开花植株茎上部新萌生的侧枝 完全未开放的花蕾 光照状况 每日用日光灯照射12 h 开始不需要光照,幼小植株形成后需要光照 操作流程 菊花组织愈伤组织长出丛芽―→生根菊花植株 影响因素 选材、营养、激素、pH、温度、光照等 基本过程 脱分化、再分化 注意点 影响植物组织培养的因素及成功的关键
(1)影响因素
①内部因素:材料的选取。
②外部因素:营养成分的种类及配比;植物激素的用量及使用顺序;pH、温度、光照等。
(2)获得成功的关键
①植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗逆性差,对培养条件要求较高。
②培养材料一旦被微生物污染,就会导致实验失败。原因是微生物增殖快,生长迅速,消耗养分多,并产生代谢废物毒害培养材料。
③无菌技术主要包括对操作空间、实验用具、实验材料以及操作者的消毒灭菌。
1.思维辨析
(1)在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂,可获得染色体加倍的细胞。( )
(2)植物组织培养应在无菌条件下进行。( )
(3)二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株。( )
(4)培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是组织培养。( )
(5)被子植物的花粉发育要经过小孢子四分体时期、双核期和单核期等阶段。( )
(6)如果通过植物组织培养从愈伤组织中提取某种成分,应先使用生长素后使用细胞分裂素。( )
答案 (1)× (2)√ (3)× (4)√ (5)× (6)√
2.下列有关植物组织培养的叙述,正确的是( )
A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞
B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株
C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子
D.植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得
答案 D
解析 愈伤组织的细胞排列疏松而无规则,是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞,不具有特定的结构和功能;二倍体植株的花粉中只含一个染色体组,培养得到的个体为单倍体,高度不育,其幼苗需用秋水仙素处理后才能稳定遗传;愈伤组织不能用于制备人工种子;用特定的选择培养基可筛选出所需要的突变体类型。
3.下列关于植物组织培养的叙述,错误的是( )
A.一般来说容易进行无性繁殖的植物,也容易进行组织培养
B.对菊花茎段进行组织培养,不加植物激素也能成功
C.接种后的锥形瓶放入无菌箱中,给予适宜的温度和光照即可
D.移栽生根的试管苗之前,先打开瓶口,让试管苗在培养间生长几日
答案 C
解析 容易进行无性繁殖的植物其细胞全能性较高,容易进行组织培养,A正确;菊花茎段对诱导条件灵敏,即使无植物激素添加,还有许多别的营养元素,本身也具有内源激素,因此不添加激素也能成功,B正确;接种后应暗处培养,有利于脱分化产生愈伤组织,光照下会分化产生维管组织,不利于愈伤组织的产生,C错误;移栽生根的试管苗之前,先打开瓶口,让试管苗在培养间生长几日,目的是提高适应能力,D正确。
4.关于影响花药培养的因素的说法,不正确的是( )
A.材料选取和消毒是花粉植株诱导成功的关键
B.选择盛开的或略微开放的花
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