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- 2017-01-02 发布于贵州
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PspA免疫小鼠抗肺炎链球菌侵袭性感染研究 作者:胥文春,曹炬,许颂霄,罗进勇,朱旦,尹一兵
【摘要】 目的:获取原核表达的肺炎链球菌PspA重组蛋白并研究其作为疫苗的价值. 方法:分离培养肺炎链球菌TIGR4,获取其染色体DNA,采用基因体外重组法将编码PspA抗原表位在内的部分序列克隆到原核表达载体PET内,酶切及测序鉴定重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导,将获得的重组蛋白用Western Blot鉴定,镍柱纯化并透析除盐. 用重组蛋白免疫动物,观察PspA抗体对肺炎链球菌感染小鼠的保护作用. 结果:DNA序列与GenBank中的数据相符,所表达纯化的蛋白经Western Blot证实为PspA,其抗体在肺炎链球菌感染中对小鼠有保护作用. 结论:重组PspA刺激产生的抗体能够有效抵抗肺炎链球菌TIGR4侵袭性感染,该重组蛋白可作为肺炎链球菌多肽联合疫苗的组成部分之一.
【关键词】 肺炎链球菌
0引言
肺炎链球菌是引起肺炎、脑膜炎和中耳炎的主要病原菌,疫苗侯选蛋白主要集中在其表面的毒力因子如肺炎链球菌表面蛋白A和胆碱结合蛋白A等[1-2]. PspA是最早确定的肺炎链球菌毒力因子之一,它可以与乳铁蛋白结合而使乳铁蛋白丧失功
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