细胞活体染色技术..pptVIP

细胞活体染色技术 于鹏远 生物技术 * 实验目的 学习细胞活体染色的方法。 观察动、植物活细胞内线粒体，液泡系的形态、数量与分布。 * 细胞膜结构 * 实验原理 一般的生物材料不能穿透细胞膜，只有当细胞被固定后，细胞膜被破坏，染料才能进入细胞内部。但是，有一些染料（称“活体染料”）却能进入活细胞，它们是一些无毒或毒性很小的染色剂，能使细胞中某些特定结构着色。活体染料基本上不影响或很少影响细胞的生命活动。 * 活染法弥补了活观察法不能显示细胞精细结构的不足，也避免了固定染色法对细胞结构的破环和造成人为假象的弊病。遗憾的是，适宜活体染色的染料较少，能显示出的结构和种类也不多。 活体染色分为体内活染和体外活染两种。前者是将染料注射于生物体内，染色后再取材观察。后者是取材后，对离体的活细胞进行染色。为保持离体细胞的正常存活，染色时需供给细胞以正常的温度，渗透压，PH等。 * 活体染色 * 较为常见的活体染色剂 詹纳斯绿B(Janus green B) 中性红 台盼蓝(trypan blue) * 詹纳斯绿B(Janus green B) 专一用于线粒体的染色。它可以和线粒体中的细胞色素C氧化酶结合，保持氧化状态(即有色状态)呈蓝绿色,而在周围的细胞质中染料被还原,成为无色状态。 必须指出的是，只有具有活性的细胞色素C氧化酶才能够把詹纳斯绿B氧化，从而使它显出颜色 * 人口腔上皮细胞