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- 2017-01-03 发布于贵州
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一丁基锡和二丁基锡致小鼠骨髓细胞DNA损伤 作者:付保荣 曹向宇 惠秀娟 马溪平 李法云 谢明 【摘要】 目的 研究不同剂量的一丁基锡、二丁基锡对体外培养的小鼠骨髓细胞DNA损伤作用。方法 应用彗星试验检测不同浓度一丁基锡、二丁基锡对小鼠骨髓细胞DNA损伤。结果 结果1×10-10,1×10-11?g/L剂量的一丁基锡、二丁基锡与对照组比较,差异有统计学意义。随着剂量的增加,DNA损伤也越严重,存在着明显的剂量-效应关系。组间比较,差异有统计学意义 。结论 体外条件下,一丁基锡、二丁基锡可引起小鼠骨髓细胞DNA的损伤。
【关键词】 一丁基锡;二丁基锡;骨髓细胞;DNA损伤;彗星试验
丁基锡化合物广泛地用于工业、农业、各种杀虫剂、除草剂、纺织品防霉以及海洋船只防污涂料中。其中,三丁基锡化合物被认为是迄今为止由人为因素大量进入海水环境的最毒的化学品之一〔1〕。环境中极低含量的有机锡就可对水生物产生毒性影响,并可通过食物链进入人体,危害人类健康,因而受到研究者的关注〔2〕。以往研究者只是通过宏观的动物实验研究毒性较强的三丁基锡的毒性,却忽视了体内降解后一丁基锡和二丁基锡的毒性〔3〕,并且对有机锡的研究局限于较高剂量〔4〕。本试验主要通过灵敏度高的彗星试验探讨一丁基锡和二丁基锡在小于ng/L剂量下对小鼠骨髓细胞可能产生的影响情况,为进一步在分子水平上研究丁基锡化合物对生物的影响提供理论依据,以便对有机锡化合物的生物效应评价提供参考资料。
1 材料与方法
1主要试剂
一丁基锡、二丁基锡。甲基磺酸甲酯,二甲基亚砜,TritonX,溴化乙锭。
1试验动物
ICR小鼠,体重25?g左右,常规喂养,观察1周后,健康小鼠供试验用。
1方法
1取材
小鼠颈脱臼处死后,取出小鼠股骨,用骨剪剪断两端膨大处,用注射器吸取少许D液从股骨一端注入,将骨髓冲洗入玻璃离心管中,直至股骨发白,离心后用D液调整细胞浓度为106~107个/ml,4℃冷却待用。
1染毒
将制得的细胞分装于9个5?ml刻度玻璃离心管中,用RPMI1640培养液将体积加至2,然后于每管中加入受试物、阳性药甲基磺酸甲酯,使一丁基锡、二丁基锡的最终浓度在骨髓细胞中为1×10-10,1×10-11,1×10-12?g/L,另设单蒸水作为空白对照,DMSO为阴性对照,混匀后置于37℃恒温水浴中染毒1,染毒期间,不定时轻摇离心管混匀细胞。染毒结束后,1?000r/min离心5min,去清液,以100?μl冰冷的D液重悬细胞,台盼兰染色测定细胞存活率。
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