Alltech 2000型蒸发光散射检测器解决HPLC检测难题课件.ppt

~ Davison 从分析到制备的解决方案 美国奥泰公司(Alltech)于2004年8月并入Grace公司，隶属于三大 分支之一的Davison旗下的探索科技部门。 Davison是全球最大的硅胶生产商，能够为LC,GC和LC的应用提供从小规模研发到大规模工业生产的一站式解决方案。 大纲 常规检测器的回顾 ELSD的检测原理 ELSD与常规检测器的比较 ELSD在分析上的优点 Alltech ELSD的介绍 ELSD的维护 质量保证 总结 其它检测器的介绍 紫外可见UV/Vis 示差折光RI 荧光Fluorescence 质谱Mass Spectrometry 检测器的应用分布 紫外/可见检测器UV/VIS 优点： 易于操作 可靠性 费用相对低廉 溶剂梯度兼容 对样品没有破坏性 相对灵敏度高 荧光检测器Fluorescence 优点： 很好的灵敏度 很好的选择性 受流速和温度的变化影响很小 示差折光检测器RI 优点： 通用性-对几乎所有的物质具有相应 宽的动态线性范围--104 易于操作 质谱 MS 优点: 灵敏度高 选择性好 提供化学结构信息 蒸发光散射检测器ELSD 发展历史 检测原理 局限性 优点 在分析中的应用 发展历史: 第一台商业化的产品出现在80年代初期 ? 最早的应用集中在聚合物的分析上 ? 90年代初期，更多其它方面的应用 ? 目前,应用在广泛的领域 ELSD行业超过20年的领先制造经验: 独特的检测方法： 检测三部曲: 雾化 溶剂的蒸发 检测 第一步：雾化 色谱柱流出物通过喷雾器针孔 与氮气混合 形成均匀的雾状液滴(气溶胶) 第二步：溶剂的蒸发 液滴通过加热的漂移管 流动相蒸发 干燥的样品颗粒保留 第三步：检测 样品颗粒通过流动池 激光“撞击”颗粒被散射 光电二极管检测散射光 检测角度为90℃，避免虚假 信号(90℃折射/衍射光；90℃反射光) 两种类型气溶胶处理方式： A型-所有液滴进入漂移管及流动池(又称为“无气溶胶分流 No Aerosol Splitting”) B型-部分液滴分流排掉；只有一部分进入漂移管及流动池(“气溶胶分流Aerosol Splitting”) A型ELSD-气溶胶不分流操作 所有样品从喷雾器进入漂移管及流动池 需要较高温度才能完全蒸发流动相； A型ELSD只有不分流一种操作模式 B型ELSD-气溶胶分流操作 部分样品被排掉 较低的温度已足够蒸发所有溶剂 B型ELSD只有分流一种操作模式 Alltech 2000(ES)型ELSD 唯一提供两种操作模式的ELSD，在任何流动相及样品分析条件下均达到最佳结果 一台仪器，两种操作模式： 撞击器(Impactor)关-所有液滴进入漂移管及流动池(A型ELSD-无分流) 撞击器(Impactor)开-部分液滴被排除，只有一部分进入漂移管及流动池(B型ELSD-气溶胶分流) 采用新型专利“气溶胶分流技术” US Patent #6229605 撞击器关模式 撞击器与气溶胶流向平行 所有样品流过漂移管到达流通池 最适用于非挥发性样品及挥发性溶剂(大部分为有机) 撞击器开模式 撞击器垂直于气溶胶流向，部分液滴碰上撞击器从废液管排掉;其余穿过撞击器，经过漂移管到达流动池 最适用于半挥发性样品及低挥发性溶剂(大部分为水溶液) 撞击器关-最适合非挥发性样品 非挥发性样品在撞击器“关”的情况下也不挥发，全部进入流动池，得到最高灵敏度 撞击器关-最适合挥发性溶剂 有机溶剂在较低温度蒸发，在撞击器“关”的情况下，也会完全蒸发，B型ELSD 任何条件下均分流，造成样品损失，降低检测灵敏度 撞击器开-最适合半挥发性样品 在撞击器开情况下，可以较低温蒸发溶剂，防止半挥发性样品蒸发 撞击器开-在几乎室温下检测半挥发样品 ELSD的局限性 1. 只能使用挥发性的流动相 2. 样品的挥发性必须要小于流动相 3. 检测器响应是非线性的 挥发性的流动相改性剂#1 挥发性的流动相改性剂#2 载气流速与漂移管温度 载气流速与漂移管温度 载气流速与漂移管温度 如何应对非线性响应的检测器？ 选择2阶方程或者幂指曲线方程 使用曲线的仅仅线性部分 使用log/log 双对数方法产生线性曲线 即:对照品的浓度和面积同时取对数,至少两个点得到直线方程 在中国药典2005版中，中药计算采用两点双对 数方法,抗生素计算采用三点双对数方法 Log-Log线性方程 ELSD--功能强大的HPLC检测器 通用性高-可检测任何挥发性低于流动相 的化合物 灵敏度好-比示差及低波长紫外灵敏 一致的响应-给出准确的样品浓度 用途广泛-梯度相容，改善分离及缩短分析时间 ELSD响应因子的一致性 不同的物质在蒸发