高效液相色谱技术..pptVIP

高效液相色谱法 生命试验中心 何 海 辉 hehh@ustc.edu.cn Tel:3607335 第一节 概述 高效液相色谱法：以气相色谱为基础，在经典液相 色谱实验和技术基础上建立的一种液相色谱法 一、历史 1906年 俄国植物学家Tsweet创立色谱法 30年代 茨维特分离绿叶色素 40年代 TLC，纸色谱 50年代 GC出现使色谱具备分离和在线分析功能 60年代末 HPLC出现，使色谱分析范围进一步扩大 二、高效液相色谱仪流程图 续前 三、HPLC的特点和应用 “三高” “一快” “一广” 第二节 基本理论和条件选择 一、塔板理论 二、速率理论 三、HPLC法中分离条件的选择 HPLC法中分离条件的选择 1. 固定相与装柱方法的选择： 选粒径小的、分布均匀的球形固定相（dp≤10μm） 首选化学键合相，匀浆法装柱 2. 流动相及其流速的选择： 选粘度小、低流速的流动相——甲醇，1ml/min 3. 柱温的选择： 选室温250C左右 第三节 各类高效液相色谱法 一、液固吸附色谱法（LSC） 二、液液分配色谱法（LLC