广东省东莞市2 628例妇科患者人乳头状病毒感染调查分析.docVIP

广东省东莞市2 628例妇科患者人乳头状病毒感染调查分析 　　[摘要] 目的 调查东莞地区妇女宫颈HPV感染情况及其亚型分布，为预防HPV感染和宫颈癌防治提供有价值的参考资料。 方法 采用反向斑点杂交-基因芯片技术（RDB）检测我院妇科门诊2 628例不同年龄患者宫颈中HPV感染情况与分型情况，并对HPV亚型感染情况进行对比分析。 结果 2 628例标本中HPV感染阳性率为17.6%，其中单一型感染率为14.0%，主要以HPV16、52和51型感染为主，双重及多重感染率为3.6%，主要以HPV16、58、11、53、51型感染为主；20～40年龄组、41～50年龄组与50岁以上年龄组HPV感染率分别为17.8%、14.1%、29.1%，差异具有统计学意义（P 0.05）。 结论 东莞地区妇女宫颈HPV感染主要以16、52和53型感染为主，反向斑点杂交-基因芯片技术可对HPV进行分型，为宫颈癌的防治与流行病学研究提供了技术支持。 　　[关健词] HPV；反向斑点杂交-基因芯片；HPV基因分型 　　[中图分类号] R737.3 [文献标识码] C [文章编号] 1673-7210（2013）03（a）-0134-02 　　人乳头状病毒（human papilloma virus，HPV）是一种具有严格宿主范围和嗜上皮性的DNA病毒，分子流行病学研究证实HPV是引起宫颈癌变的主要致病因素[1]，90%以上的宫颈癌标本中有HPV-DNA的存在[2]。临床上开展HPV基因检测是早期宫颈癌筛查的主要方法之一，目前已发现的HPV 亚型约100多种，能感染女性生殖系统的HPV分为低危型和高危型HPV，高危型HPV持续感染及多重感染是引起宫颈癌变的重要原因之一。本研究对东莞地区2 628例妇女HPV感染的流行病学进行回顾性分析，以期了解本地区HPV感染现状，为宫颈癌的防治提供有价值的参考资料。 　　1 对象与方法 　　1.1 研究对象 　　2010年1月～2011年2月来我院妇科门诊就诊患者2 628例，年龄18～68岁，中位年龄32岁。2 628例患者为初次在妇科门诊进行HPV核酸检测，均无宫颈疾病治疗与抗HPV药物治疗史。 　　1.2 仪器与试剂 　　HPV基因分型检测试剂购于中山大学达安基因公司，配有试剂盒Ⅰ和试剂盒Ⅱ，试剂盒Ⅰ主要为PCR反应液，试剂盒Ⅱ为HPV各亚型杂交膜条、杂交液、TMB等。PCR仪为ABI 9700，杂交仪为电热恒温振荡水槽（上海精宏）。 　　1.3 实验方法 　　1.3.1 标本采集 宫颈脱落细胞：在无菌条件下，将棉拭子伸入宫颈内，旋转数周并停留片刻后取出，标本密封保存于2～8℃备用。 　　1.3.2 核酸提取 向标本中加入1 mL灭菌生理盐水，充分震荡摇匀，挤干棉拭子；吸取全部液体转至1.5 mL离心管中，12 000 r/min离心5 min；去上清，沉淀加入50 μL DNA提取液充分混匀，恒温处理（10±1）min；12 000 r/min离心5 min，备用。 　　1.3.3 PCR扩增HPV DNA 取5 μL DNA提取物加入HPV核酸PCR扩增体系组份，扩增条件：93℃ 3 min；93℃ 40 s，55℃ 40 s，72℃ 40 s，40个循环；72℃延伸7 min。 　　1.3.4 杂交及分析过程 杂交、洗膜与显色均严格接照说明书进行，杂交膜条上显示蓝色斑点为阳性，多个斑点为多重感染。统计HPV感染率及基因型分布。 　　1.4 统计学方法 　　应用SPSS 12.0统计软件处理数据。计数资料以率表示，采用χ2检验。以P 0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 HPV感染情况 　　2 628例患者中463例HPV检测阳性，阳性率为17.6%，其中单一感染368例，双重及多重感染95例，感染率分别为14.0%和3.6%。从年龄分布上分析，50岁年龄段的患者HPV感染率最高，为29.1%（25/86），其次为20～40岁的患者，感染率为17.8%（381/2 140），各年龄组HPV总体感染率有统计学意义（P 0.05）。各年龄段患者HPV感染情况。 　　2.2 HPV单一感染情况 　　368例单一感染患者主要以HPV16、52和51型感染为主，分别为115例（31.2%）、68例（18.4%）和44例（9.8%）。其中低危型（HPV6、11型）感染12例（12/368，3.26%），高危型感染（HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、亚型CP8304型）356例（356/368，96.74%）。 　　2.3 HPV双重及多重感染情况 　　95例双重及多重感染中，双重感