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适体分子信标荧光共振能量转移法检测尿腺苷 　　【摘要】 目的：利用荧光共振能量转移原理和适体分子信标探针技术开发腺苷检测体系。方法：以金纳米粒子作为荧光共振能量转移受体。结果：在最适条件下，腺苷浓度在2.0×10-8～1.8×10-6 mol/L范围内线性关系良好（r=0.9961），腺苷的检出限为6.0×10-9 mol/L，腺苷测定的回收率分别为97.6%、102.1%、105.8%。结论：将新方法应用于实际尿样中腺苷的检测，与高效液相色谱法比较差异无统计学意义。 　　【关键词】 分子信标； 荧光共振能量转移； 腺苷 　　中图分类号 R446.12 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2014）14-0137-03 　　Detection of Adenosine with Fluorescence Resonance Energy Transfer and Aptamer Molecular Beacon/HE Yan，ZHANG Jin-quan，DENG Yang-yong，et al.//Chinese and Foreign Medical Research，2014，12（14）：137-139 　　【Abstract】 Objective：A new method for the detection of adenosine has been established by using fluorescence resonance energy transfer and aptamer molecular beacon.Method：Using gold nanoparticles as fluorescence resonance energy transfer recepter.Result：Under the selected condition ， the concentration of adenosine in the range of 2.0×10-8-1.8×10-6 mol/L（r=0.9961）.The limit of detection for adenosine was 6.0×10-9 mol/L.The recoveries were 97.6%，102.1%，105.8%.Conclusion：The present method has been applied to determination of adenosine in real urine samples，and the obtained results were in good agreement with those obtained by the HPLC method. 　　【Key words】 Molecular beacon； Fluorescence resonance energy transfer； Adenosine 　　First-author’s address：Xiangtan Vocational Technical College，Xiangtan 411101，China 　　1996年，Tyagi等[1]首次建立了分子信标探针，其最初目的在于定量液相中的靶标量。分子信标是一种设计巧妙的荧光探针，探针的5’端及3’端分别标记荧光素分子及猝灭剂分子。自由状态时，发夹结构的两个末端靠近，使荧光分子与猝灭分子靠近（7～10 nm），此时发生荧光共振能量转移（FRET）[2-4]，使荧光分子发出的荧光被猝灭分子吸收并以热的形式散发，荧光被猝灭，荧光本底极低。当分子信标与序列完全互补的靶标分子结合形成双链杂交体时，信标茎杆互补区被拉开，荧光分子和猝灭分子距离增大。本实验利用荧光共振能量转移原理和适体分子信标探针技术开发出适体结构开关偶联金纳米粒子猝灭6-羧基荧光素体系检测腺苷，这个检测体系由于引入金纳米粒子作为猝灭基团，金纳米粒子对荧光素的猝灭效率要比常规猝灭剂（DABCYL）高[5]。因此，本研究新建立的方法比常用猝灭剂（DABCYL）[6]所建立检测方法的检出限和灵敏度更好。 　　1 仪器与试剂 　　1.1 仪器 　　Hitachi-F4500荧光分光光度计（日本日立公司）；Shimadzu UV-2450紫外-可见分光光度计（日本岛津仪器公司）；Shimadzu LC-20A 高效液相色谱仪（日本岛津仪器公司）；Glamour-1800 全自动生化分析仪（美国MD仪器公司）；PB-20（PB-S）型精密酸度计（Sartorius Co.Ltd）。 　　1.2 试剂 　　腺苷（99%，AR，美国Amresco公司）标准储备液：准确称取0.0267