肝胆酸标准操作流程.doc

美康试剂标准操作程序 项目 甘胆酸 编号 共6页 方法 胶乳增强免疫比浊法 用途 用于人血清中甘胆酸(CG)浓度的定量测定 制定人 审核人 批准人 批准日期 发布日期 生效日期 目录 1实验原理和检验目的 2标本采集和处理 2.1标本种类和采集方法 2.2标本处理方法 3试剂 3.1试剂组成和 3.2试剂准备 3.3试剂稳定性 4校准 4.1校准品 4.2校准品 4.3校准品稳定性 4.4 5质控 5.1质控品 5.2可接受性判断 5.3质控操作 6操作 7.计算方法 8参考值 9操作性能 10 结果处理 11方法局限性 12注意事项 13参考文献 14 技术服务 1实验原理和检验目的 包被有甘胆酸抗体的胶乳颗粒可与血清中的甘胆酸产生凝集反应，形成抗原抗体复合物，其浊度高低在一定量抗体存在时与血清中CG成正比。通过测定特定波长的吸光度值，参照校准曲线即可计算出血清中CG的浓度。甘胆酸(Cholyglycine, CG) 是胆酸与甘氨酸结合而成的结合型胆酸，是主要胆酸之一，在血清中主要以蛋白结合形式存在，分子量为465.6。甘胆酸在肝细胞合成，经胆管排入胆囊贮存，餐后胆囊收缩，随同胆汁排入小肠，参与脂肪的消化吸收。95%的胆酸在回肠末端重吸收，经门静脉输送至肝脏由肝细胞摄取后，再泌入胆汁。当肝细胞受损或胆汁郁滞时，肝细胞不能有效地摄取经肠肝循环达肝脏的甘胆酸，致使血中的CG含量增高；胆汁郁滞时，肝脏排泄胆酸发生障碍而返流入血循环中，亦可使血中CG含量增高。急性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化及胆石症患者CG明显升高；梗阻性肝病和药物性胆汁郁积症患者CG也会升高[1]。 . 血清。样本采集后请尽快离心测定。干扰物质：血红蛋白≤5g/L，非结合胆红素≤20mg/dL，结合胆红素≤28.8mg/dL，乳糜≤1450FTU，类风湿因子≤150IU/mL对检测结果无影响。 试剂 成 分 浓度 试剂1 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 12.1g/L 氯化钠 5.85g/L 聚乙二醇6000 20g/L 试剂2 包被有鼠抗人甘胆酸抗体的胶乳颗粒 4.5g/L 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 12.1g/L 牛血清白蛋白 2g/L 吐温20 2mL/L 3.2试剂准备 本试剂为液体，可直接使用 3.3试剂稳定性 试剂盒在2～8℃避光保存，可稳定1年，试剂不得冷冻。试剂开瓶后，2～8℃可稳定1个月。 4.1校准品准备 建议使用本公司校准品。本产品使用时一般采用多点校准每2周或当发生以下情况时，建议重新校准：变更试剂批号；质控值发生显著偏移；生化分析仪进行了较大的维护。建议2可接受性判断 质控物的检测值应在给定质控范围，或可以通过参加卫生部室间质评对实验室的运作情况进行系统评估。 5.3 质控操作 每日进行样本检测之前首先应进行质控操作，以考察系统的在控情况。如果检测结果符合质控要求则进行样本操作；如果不符合质控要求，则应重复质控操作，以排除可能发生的偶然误差；如果仍不符合质控要求，则应考虑质控品的重新准备、试剂的重新校准或更新、仪器的维护等。建议在样本的检测过程中和或结束后再次进行质控操作，以考察样本的检测全过程的在控情况。 6操作 6.1各机型参数设定 罗氏P800生化分析仪检测参数: Test 项目 CG Assay Code/Time 分析方法 2PointRate Wavelength（2nd/Primary） 波长（副/主） 415/340 Assay Point 测光点 12/25 ABS Limit 吸光度界限/反应方向 32000/ INCREASE S.Vol 标本量 15 Reagent T1 试剂1 200 Reagent T2 试剂2 50 Reagent T3 试剂3 　 Reagent T4 4 　 Calibration Type Logit(4P) K 计算系数K 　 SD Limit 999 Duplicate Limit 离散度界限 -32000～32000 S1 ABS Limit 空白吸光度界限 -32000～32000 Expected Value 参考值范围 　 Technical Limit 　 Unit mg/L STD(1)Conc 校准品（1） #.##(混合血清) STD(2)Conc 校准品（2） # STD(3)Conc 校准品（3） # STD(4)Conc 校准品（4） # STD(5)Conc 校准品（5） # STD(6)Conc 校准品（6） # 7计算方法 采用多点校准，多参数曲线方程（