超微结构基知识讲座.pptVIP

一 、取材、样品制备与课题设计密切相关 取材前要问几个问题: a 所要研究对象的解剖位置是否清楚?如海马….肾小球病变. b 要观察样品的外部还是内部结构？＿取材和固定前的处理不同（ＴＥＭ／ＳＥＭ），如肠上皮、牙齿髓腔的观察．．． c 是定量还是定性？ d 有横/纵向之分吗? 肌肉﹑神经等 ２. 取材、固定 组织取材: 大小(1X1X5mm3)、部位(与要观察的对象有关) 原则:保证样品的超微结构不受损伤及细胞原有的定位. 注意事项:⑴切取组织动作要迅速; ⑵低温操作; ⑶取材用的刀具要锋利; ⑷组织块要切小; ⑸部位要准确可靠. (6)做好文案工作:标本编号、各项相关资料等 3.各类标本的取材 ①实体组织标本的收集 培养细胞:量的多少能做(培养瓶\孔板)；一般1mm3即可，１２或２４孔均可做ＴＥＭ／ＳＥＭ，其方法不同．ＳＥＭ细胞可更少． 二、超微结构观察与研究中值得注意的问题 1 、局部与整体的关系: EM下:极小的一部分,超薄切片获得的样品厚度只有一个细胞的几百分之一……必须同时进行大体和组织学的观察,才能获得全面的资料. 2 、静态和动态的关系:在常规电镜技术中,不能观察活细胞,故细胞结构是瞬间静态的图象,实际上,细胞是运动和变化