第03章 细胞生物学研究方法课件.ppt

体视荧光显微镜 用途： 1、活细胞荧光标记蛋白的长时程失踪观察 2、活细胞运动分化形态示踪观察 3、荧光共定位 4、荧光共振能量转移（FRET） 5、荧光图像处理、测量 人类染色体端粒DNA的荧光原位杂交照片 ?原理及应用： ?利用同位素的放射自显影，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究； ?实现对细胞内生物大分子进行动态研究和追踪。 ?步骤： ?前体物掺入细胞（标记：持续标记和脉冲标记） ———放射自显影 ? 细胞显微分光光度术（Microspectrophotometry） ?利用细胞内某些物质对特异光谱的吸收，测定这些物质 （如核酸与蛋白质等）在细胞内的含量。 包括： 紫外光显微分光光度测定法 可见光显微分光光度测定法 ? 流式细胞仪（Flow Cytometry） ?主要应用： 用于定量测定细胞中的DNA、RNA或某一特异蛋白的含量； 测定细胞群体中不同时相细胞的数量； 从细胞群体中分离某些特异染色的细胞； 分离DNA含量不同的中期染色体。 流式细胞术 ? 细胞的培养 ? 细胞工程 ? 动物细胞培养 ? 类型：原代培养细胞（primary culture cell） 继代培养细胞（sub-culture cell）