2016参考模板-现代细胞生物学方法与技术技巧.doc

硕士研究生考试试题 参考答案及评分标准 ……………………………装……………… 订………………线………………………… 学院：　生命科学学院　　 专业： 细胞生物学 考试科目：现代细胞生物学方法与技术 学期：2015—2016学年第二学期 注：重在考察学生的综合能力，答案不作严格限定，仅作为参考。 1、 结合实例，简述细胞原代培养原理、主要过程及注意事项。（10分） 要点1：原理：将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。（1分） 要点2：细胞培养主要过程（以胶质细胞为例）（分） 1) 新生小鼠拉颈椎致死，置75%酒精泡2-3秒钟（时间不能过长、以免酒精从口和肛门浸入体内），将新生小鼠在超净台内解剖取脊髓，置平皿中; 2） ?用Hank’s液洗涤三次。 3）?用手术剪将肝脏剪成小块（1 mm2），再用Hank’s液洗三次，转移至小青霉素瓶中; 4） ?视组织块量加入5-6倍的0.25%胰酶液，37℃中