第三章细胞工程讲述.ppt

第三章 细胞工程（cell engineering） 一、概述 问题：1、什么是细胞工程？ 2、发展简史如何？ 3、细胞工程的基本技术是什么？ 1、什么是细胞？什么是细胞工程？ 细胞工程：根据生物学和工程学的原理，在细胞水平上定向改造细胞的遗传物质，培育具有新性状的生物个体或细胞群体，并利用它们为人类生产各类药品和其他产品以及提供服务的技术体系。 2、发展简史如何？ 1）1838（最早）马勒，在脊椎动物的肿瘤细胞中观察到多核现象 2）1849-1858年 科学家们在肺组织和各种正常组织及发尖和坏死部位都发现了多核现象。 3）1859年，A.巴里解开了这个谜团，他认为“多核现象”是由“单个细胞融合”而成的。 4）到了1907年哈林发现了细胞培养的方法。使人们能应用这种细胞培养技术。 5）直到1960年，英国诺丁汉大学科金教授创造性地应用酶解的方法，才首次成功地从番茄幼苗的根部制备到大量的原生原体。在此基础上，1972年美国的卡尔森等人用 NaBO3作为融合的诱导剂，将来自不同种的两个烟草原生质体进行融合，获得世界上第一个体细胞杂种植株。此后，分别以凯乐、高国楠和乔默尔曼等为首的三个科学家小组，从不同方面改良和发展了植物体细胞融合技术。 6)近年来，在植物细胞融合研究方面的突出进展是建立了单对细胞融合体系培养技术，并基本上解决了融合细胞的选择问题。现在，植物原生质体及其应用的研究已成为植物细胞工程中最活跃的研究领域之一。 3、细胞工程的基本技术是什么？ 1)细胞培养技术：是将生物体的某一部分组织取出一小块，在体外进行表面消毒处理后，使之分散成单个游离的细胞，并放置在人工配制的培养基中进行培养，使之生长分裂的技术。 由于生物体的一种组织，往往包含有两种以上的细胞，如叶片组织至少含有叶肉细胞，维菅束鞘细胞和表皮细胞在培养过程中不易分开，所以细胞培养有时叫组织培养或统称为细胞与组织培养。 11`  2)细胞融合技术（也称细胞杂交技术）：细胞融合技术是60年代创立的。它是在一定条件下，使不同来源的两个或多个细胞合为一个细胞并增殖或形成新的生物体的技术。 动物细胞无细胞壁，可直接诱导融合； 植物细胞进行融合时，必须先除去细胞壁。 意义：动物细胞融合技术的成功，导致了淋巴细胞 杂交瘤技术的出现，植物融合技术的成功不仅打破了杂交育种的亲和性障碍，而且为实现“超远缘杂交”提供了可能，因此在植物育种上有重大的意义。 二、动物细胞工程 问题：1、什么是动物细胞工程？研究的内容是什么？ 2、动物细胞工程技术层次如何？ 3、动物细胞工程有何理论与实践意义？ 4、动物细胞培养有何特征？ 1、什么是动物细胞工程？研究的内容是什么？ 动物细胞工程：是根据细胞生物学及工程学的原理，利用生物技术对动物细胞进行遗传操作，定向改造动物的遗传性，创造新的物种，以及从动物组织中分离有特定的功能的细胞并通过工程化在体外条件下使之快速繁殖，产生特定生物产品的工艺。 内容： 人工受精（体外受精） 胚胎移植 核移植 哺乳动物孤雌生殖 双胞及嵌合体 性别选择 胚胎分割及保存 细胞融合 动物细胞大规模培养 动物细胞反应动力学 动物细胞反应器 2、动物细胞工程技术层次如何？ 遗传操作可在不同层次上进行： 1）、在整体细胞水平上，利用细胞培养的各种工艺对细胞进行改造或用细胞融合的方法制备各种杂种细胞； 2）、在细胞器水平上，可以进行核移植，染色体注射或将微核人工细胞等进行融合以制备各种细胞质体，或改变染色体的组成倍性； 3）、在基因水平上，有采用外源基因导入的方法，赋予细胞以新的特征和新的功能。 4）、通过制备全能性的胚胎干细胞，经过遗传操作进而把它种植到假孕动物的子宫里孕育成动物以培育出新品种。 3、动物细胞工程理论与实践意义 理论与实践意义：哺乳动物细胞是生产许多有着重要经济价值的医药产品的理想场所：它具有促进蛋白质精确表达与形成三维结构的内环境，能进行乙基化、二硫键等；它所产生的蛋白质能分泌到细胞外，具有完全正常的蛋白质的结构。因此用动物细胞工程生产的产品，其分离纯化的程序比工程菌生产的产品要简单得多，而且功能也可靠得多；另外通过动物细胞工程，还可以研究诸如细胞衰老调亡，基因定位遗传病因等基础理论问题。 4、动物细胞培养有何特征？ 4、动物细胞培养有何特征？ 在培养动物细胞时必须注意什么问题呢？ 1）、培养时要用抗生素；（细胞生长缓慢，易染菌）； 2）、不能也不需要进行强力通风或搅拌（无细胞壁，很脆弱，需氧量少）； 3）、有的细胞不能用悬浮培养法（有锚地依赖性）； 4）、在进行单细胞培养时，往往需要使用条件培养基（具有群体效应）； 5）、一般不用于生