第五章遗传与变异(一)基因与基因工程题库.pptVIP

第五章遗传与变异(一)基因与基因工程题库.ppt

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一、孟德尔学说奠定了遗传学基础 (本节见参考书第101-107页) 孟德尔(1822-1884)从 1856 年起开始豌豆试验。 孟德尔的基本方法是杂交。他挑选了七对性状。 经过近 10 年的潜心研究,孟德尔发表了他的研究报告。其内容可概括两个定律。 1、孟德尔第一定律--分离律 2、孟德尔第二定律--自由组合律 3、孟德尔学说的要点 当一株植株中控制某一对性状的一对遗传因子均为隐性因子时,该植株才表现出隐性性状(如白花或绿色豆粒)。其他情况下,包括一对遗传因子均为显性,或一个显性一个隐性,均表现出显性性状(如紫花或黄色豆粒)。这一点在分离律实验中看的很清楚。 当两对性状一起加以研究时,显性和隐性的基本规律仍与上面相同,但要加上一条, 控制不同性状的遗传因子,在传代中各自独立,互不干扰,出现自由组合现象。 4、孟德尔学说的重要意义 ? 大多数生物体通常由 一对遗传因子(后来称为两个等位基因)控制同一性状。这样的生物体称为2n 个体。 ? 遗传因子可以区分为显性和隐性。 ? 控制不同性状的遗传因子是各自独立的。 (2)孟德尔提出了杂交、自交、回交等一套科学有效的遗传研究方法,来研究遗传因子的规律。孟德尔创立的这套方法一直沿用到 1950s,才被分子遗传学方法取代。 思考题 二、基因是一段 DNA 序列 (本节见书第109-113页) 1、基因在染色体上 摩根实验室用果蝇为材料的工作,确定了基因在染色体上的分布规律。 随着生物化学的发展,蛋白质、核酸等生物大分子逐渐分离、纯化出来。各方面的实验证据表明,基因的化学本质不是蛋白质,而是 DNA。格里菲斯的实验证明遗传物质可以转化进入细菌,改变细菌特性。爱弗莱的实验证实,进入细菌改变特性的遗传物质是 DNA,而不是蛋白质。 3、华生和克里克提出 DNA 双螺旋模型。 DNA 双螺旋模型说明 DNA 分子能 够充当遗传的物质基础。 4、DNA作为遗传物质的功能 一个基因一个性状?不一定。例如肤色的控制至少有三个基因参与(复等位基因,P110)。 基因决定性状,环境还起不起作用?在基因型确定的基础上, 环境常常会影响表型。 三、基因工程技术和应用 (本节参考教材第126-133页) 所以,基因工程的操作包含以下步骤: 1、 获得目的基因 2、目的基因和载体在体外连接(重组) 3、将重组的DNA分子引入合适的宿主细胞内(转化或转染) 4、选择、筛选含目的基因的克隆 5、培养、观察目的基因的表达。 到哪里去找目的基因?一般来说,人的基因,要从人体的组织细胞中去找;小鼠的基因要从小鼠的组织细胞中去找。 从组织细胞中可以分离得到人/小鼠的全套基因,称为基因文库。文库中基因总数 就人来说约有 3 万个基因。如何从中把需要的基因找出来? 采取“钓”的办法。这个办法通常称为印迹法。 印迹法的关键是“分子杂交”,利用碱基配对的原则,用一段小的已知的 DNA 片断去寻找(“钓”)大的未知的基因片断。 探针 DNA 片断从何而来? 根据目的蛋白的氨基酸序列,只要其中 N-端 15-20 个氨基酸序列,按三联密码转为 40-60 核苷酸序列,人工合成,即为探针 DNA 片断。 (2)目的基因的扩增 (3)PCR —— 把寻找目的基因和扩增目的基因两步操作并成一步。 PCR 的三个步骤为一次循环,约需5-10 分钟。每经一次循环,所找到的目的基因扩充一倍。经过 20 次循环,即可扩增 106 倍,总共只需几个小时。 (4)构造重组 DNA 分子 其次要把目的基因“装”到载体中去。“安装”的过程,需要好几种工具酶,其中关键的酶叫限制性内切酶。 此酶识别一定碱基序列,有的还可切出“粘性”末端,使得目的基因和载体的连接非常容易。 (5)转化/转染—表达—蛋白质分离 重组 DNA 分子进入寄主细胞后,其中的目的基因能否表达,表达效率高低,还有很大差别。表达通常是指目的基因编码的蛋白质合成。基因工程的最后一步,是把所获得的蛋白质分离纯化,得到蛋白质产品。 2、基因工程的应用 (2)用于提高奶酪产量 生产奶酪的凝乳酶传统上来自哺乳小牛的胃。现在可以通过基因工程办法,用酵母生产凝乳酶,大量用于奶酪制造。 1982年,转基因动物首先在小鼠获得成功。1984年,中科院水生所研制出世界

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