大蒜素联合头孢哌酮对多重耐药鲍曼不动杆菌体外抗菌活性的影响.docVIP

大蒜素联合头孢哌酮对多重耐药鲍曼不动杆菌体外抗菌活性的影响 　　[摘要] 目的 评价大蒜素与头孢哌酮联合用药对临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌（MDR-ABA）体外抗菌活性。 方法 采用棋盘法设计，微量肉汤稀释法测定不同浓度组合的2组抗菌药物，分别对15株敏感ABA和15株耐头孢哌酮ABA的最低抑菌浓度，并计算FIC指数判定联合效应。 结果 大蒜素与头孢哌酮联合应用后，其MIC50显著降低；FIC指数分布： FIC≤0.5占40.8%～65.1%；0.52为0。 结论 大蒜素与头孢哌酮联用后，对鲍曼不动杆菌基本表现为协同作用和相加作用，特别是能显著提高头孢哌酮对耐药鲍曼不动杆菌的杀菌活性。 　　[关键词] 大蒜素；头孢哌酮；鲍曼不动杆菌； FIC index 　　[中图分类号] R446.5 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）21-0068-02 　　鲍曼不动杆菌（ABA）是目前医院感染主要致病菌之一。研究表明，近几年来其耐药性迅速增长[1]，甚至出现了只对多黏菌素敏感而其他抗生素均耐药的菌株[2]，近年来鲍曼不动杆菌的耐药问题逐渐成为学者们关注的焦点。这种日趋严重的耐药现象迫使我们急需一种新的抗菌药物或联合用药来控制和减少耐药菌株产生。大蒜素（allicin）是大蒜的主要成分，有抗菌、消炎及抗病原微生物、抗肿瘤等多种药理作用[3]，临床已将其广泛应用于抗感染的治疗。本文在文献研究的基础上通过对大蒜素联合头孢哌酮对多重耐药鲍曼不动杆菌的杀伤效果进行了观察，以期为临床上泛耐药的鲍曼不动杆菌的治疗提供新的视点。 　　1 材料与方法 　　1.1 分离菌株 　　30菌株临床分离的ABA，均经VITEKCompact细菌鉴定仪鉴定，其中包括15株敏感ABA和15株耐头孢哌酮ABA，排除同一患者同一部位的重复菌株。质控菌为大肠埃希菌ATCC 25922。 　　1.2 抗菌药物 　　大蒜素，批号：江苏正大天晴药业股份有限公司；头孢哌酮钠，批号130420-200304，含量96.5%，中国药品生物制品检定所。 　　1.3 培养基与药敏纸片 　　K-B法检测临床常用药物敏感试验药敏试验方法采用微量肉汤稀释法。药敏纸片均为英国Oxoid公司生产。根据2009年美国临床实验室标准化研究所（CLSI）规定的判断标准判定菌株对抗菌药物的敏感性。 　　1.4仪器 　　微量加样器和微量离心管由Eppendorf 中国有限公司生产；恒温培养箱由Thermo公司生产；比浊仪，VITEK全自动细菌鉴定仪和哥伦比亚血琼脂均由法国生物梅里埃公司生产。 　　1.5 方法 　　1.5.1 菌悬液的配制 挑取4～5个已分纯的菌落，接种于肉汤中增菌，6 h后取3 mL菌液通过比浊仪校正其浊度至0.5 MacFarland，然后再用M-H肉汤稀释至1.5×105 CFU/mL。 　　1.5.2 微量肉汤稀释法 将大蒜素和头孢哌酮的药物浓度依次倍比稀释，设置11个稀释浓度。按棋盘法设计， 将不同浓度的大蒜素与抗菌药物两两组合后取50μL加入96孔平板中，再将1.5×105 CFU/mL的菌液100μL加入孔中，37 ℃培养过夜。记录MIC值，计算（部分抑菌浓度指数）FIC指数，FIC指数=MIC甲药联用/MIC甲药单用+MIC乙药联用/MIC乙药单用。 　　1.5.3判读标准[4] FIC指数≤0.5时，两种药为协同作用；FIC指数为0.5～1.0，两种药为相加作用； l.02.0，两种药为拮抗作用。 　　2 结果 　　2.1 药敏率 　　大蒜素与头孢哌酮联合应用后，其MIC50和MIC90显著降低。见表1。 　　表1 大蒜素与头孢哌酮联用对敏感和耐药鲍曼不动杆菌MIC（mg/L） 　　2.2 FIC指数分布 　　大蒜素与头孢哌酮联用对鲍曼不动杆菌的FIC指数分布构成比， 结果显示，FIC指数分布：FIC指数≤0.5占40.8%～65.1%；0.52为0。见图1。 　　图1 大蒜素与头孢哌酮联用对鲍曼不动杆菌的FIC指数分布构成比 　　3 讨论 　　ABA广泛分布于自然界和医院环境中，是引起严重致死性院内感染的重要病原菌[5]。由于近年来抗生素的大量使用或滥用，导致多重耐药甚至泛耐药ABA的大量出现，已成为临床治疗面临的严峻挑战，引起了医学界高度重视[6]。从我国国家细菌耐药性监测中心可以了解到[7]，2004～2005年与2009年ABA对亚胺培南敏感率由65.1%下降至60.6%，对美罗培南敏感率由56.8%下降至55.5%，截止2009年全国12所医院（MDR-ABA）已经达到47.7%。因此，在缺乏安全有效的单一抗菌药物治疗之前，联合用药成为控制和减少耐药菌株产