3蛋白质类药物的分离纯2..pptVIP

核糖核酸酶可逆变性 定 义：加入大量中性盐以破坏Pr的稳定因素并 使从溶液中沉淀析出的现象。 原 理：破坏Pr两个稳定因素：水化膜和电荷层。 中性盐：(NH4)2SO4；Na2SO4；NaCl等。 优 点：Pr不变性，常用。 定义：带电粒子在电场力作用下向着所带电荷相 反方向泳动的现象叫电泳。 原理： ● Pr分子在溶液中可带净负电荷或净正电荷，可在电场中移动。 ● 不同Pr分子携带电荷量不同，分子大小也 不同，故在电场中泳动速度不同，可彼此分离。 A. 聚丙烯酰胺凝胶电泳（Polyacrylamide Gel Electrophoresis，PAGE） ? 以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳方法。 聚丙烯酰胺凝胶机械强度好，有弹性，透明， 化学性质稳定，对pH和温度变化小，吸附和 电渗作用小，是很好的电泳支持介质。 丙烯酰胺——单体 N，N’-甲叉双丙烯酰胺——交联剂 常规聚丙烯酰胺凝胶电泳主要特点 板状电泳 B. SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳电泳 SDS的作用原理 阴离子SDS能与蛋白质结合。 当SDS总量为蛋白量的3～10倍、且SDS单位浓度大于1mol./L时，两者的结合是定量的，每克蛋白质约结合1.4克SDS。 蛋白质分子结合SDS后，所带负电荷的量远远超过其原有电荷量，从而