非小细胞肺癌组织中VEGF—C表达与淋巴转移的关系.docVIP

非小细胞肺癌组织中VEGF—C表达与淋巴转移的关系 　　[摘要] 目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织中血管内皮生长因子C（VEGF-C）表达情况与肿瘤淋巴转移的关系。 方法 采用免疫组织化学方法检测NSCLC肿瘤组织中VEGF-C阳性表达情况和微血管、微淋巴管的密度，分析VEGF-C阳性表达与肿瘤分化情况、淋巴结转移情况、病理类型的关系，比较有、无淋巴结转移和VEGF-C阳性、阴性表达的不同肿瘤组织中微血管和微淋巴管的密度。 结果 有淋巴结转移肿瘤组织VEGF-C的阳性表达率高于无淋巴结转移肿瘤组织（χ2=15.461，P0.05）。VEGF-C阳性表达的NSCLC组织微淋巴管计数高于VEGF-C阴性NSCLC组织（t=22.080，P0.05）；有淋巴结转移NSCLC组织微淋巴管和微血管计数高于无淋巴结转移NSCLC组织（t分别为37.312、20.847，P0.05）。 结论 VEGF-C可能通过调节微淋巴管生成的数目促进NSCLC的淋巴转移。 　　[关键词] 非小细胞肺癌；血管内皮生长因子C；淋巴转移 　　[中图分类号] R734.2 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）09（b）-0056-03 　　非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）是我国发病率最高的呼吸系统恶性肿瘤之一，由于其预后差，死亡率高，严重威胁人们的生命和健康[1]。与多数恶性肿瘤一样，肿瘤细胞向其他部位侵袭和淋巴结转移是它的特点，也是影响患者预后的主要因素，NSCLC最常见的转移途径是淋巴转移，血管内皮生长因子C（vascular endothelial growth factor C，VEGF-C）能够特异性地促进淋巴管的生长，与NSCLC淋巴转移有密切的联系[2]。本文通过测定65例NSCLC组织中VEGF-C的表达情况，探讨VEGF-C与NSCLC组织淋巴管生成及淋巴转移的关系。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　65例NSCLC标本均由本院胸外科2009年1月～2012年11月送检，术前患者均未作肿瘤相关治疗，男性41例，女性24例，年龄36～78岁，中位年龄57岁。所有标本中，病理诊断为腺癌22例，鳞癌32例，腺鳞癌11例；其中高分化27例，中低分化38例，并对清理的淋巴结行病理活检，以活检阳性作为淋巴结转移的标准，31例有淋巴结转移，34例无淋巴结转移。 　　1.2 方法 　　1.2.1 免疫组织化学染色 对送检标本经甲醛固定、脱水后石蜡包埋，制成厚为4 μm的连续切片，对切片进行免疫组织化学染色，用SP法测定肿瘤组织中VEGF-C的表达水平，兔抗人VEGF-C多克隆抗体、VEGF-C受体3（VEGFR-3）抗体及鼠抗人CD31抗体均购自北京金桥公司，SP法染色严格按照操作说明书进行，用已知阳性切片作为阳性对照，磷酸缓冲液代替一抗作阴性对照。 　　1.2.2 VEGF-C结果判断 VEGF-C蛋白在NSCLC肿瘤细胞质中表现为棕黄色颗粒，根据细胞质染色的深浅评为0～3分，0、1、2、3分的染色情况分别为无色、淡黄、棕黄、棕褐（或黑色）。另外根据阳性细胞在高倍视野中的比例多少评为0～4分：0分，所占比例为0；1分，所占比例为1%～10%；2分，所占比例为11%～50%；3分，所占比例为50%～75%；4分，所占比例75%，把细胞质染色评分与阳性细胞比例评分相乘，积3分为阴性，积于3～9分为阳性[3]。 　　1.2.3 微淋巴管与微血管计数 首先用低倍镜寻找微淋巴管和微血管聚集区，然后选择5个血管和淋巴管最多的视野在200倍镜下计数，求5个视野的平均值作为该组织微淋巴管和微血管数目。视野内肿瘤组织中如出现内皮细胞，即视为微淋巴管，微血管计数采用CD31标记免疫组织化学法[4]。 　　1.3 统计学方法 　　采用SPSS 19.0软件对数据进行分析，计量资料以x±s表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，以P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 VEGF-C的阳性表达情况 　　有淋巴结转移肿瘤组织VEGF-C的阳性表达率高于无淋巴结转移肿瘤组织（χ2=15.461，P0.05）（表1）。 　　2.2 微淋巴管与微血管计数情况的比较 　　VEGF-C阳性表达的NSCLC组织微淋巴管计数高于VEGF-C阴性NSCLC组织（t=22.080，P0.05），有淋巴结转移NSCLC组织微淋巴管与微血管计数高于无淋巴结转移NSCLC组织（t分别为37.312、20.847，P0.05）（表2）。 　　3 讨论 　　VEGF-C是人类最早发现的促淋巴管生成因子[5]，NSCLC肿瘤细胞和周围基质细胞均可分泌V