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- 2016-12-28 发布于天津
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实验一、植物组织中总糖和还原糖的测定 -3,5-二硝基水杨酸比色定糖法 一.实验目的: 1.掌握 3,5-二硝基水杨酸比色法定糖的原理及方法。2.用 3,5-二硝基水杨酸定糖法测定山芋份中的总糖度及还原糖。 3.熟悉 分光光度计的原理及使用方法。 二.实验原理: 3, 5-二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内,还原糖的量和反应液的颜色强度呈比例关系,利用比色法可测知样品的含糖量。 该方法是半微量定糖法,操作简便,快速,杂质干扰较少。 三.试剂和器材 1、试剂 (1)3,5-二硝基水杨酸试剂 (又称DNS试剂): 甲液:溶解6.9克结晶酚于15.2毫升I0%氢氧化钠中,并稀释至69毫升,在此溶液中加入6.9克亚硫酸氢钠。 乙液:称取255克酒石酸钠,加到300毫升10%氢氧化钠中,再加入880毫升1%3,5-二硝基水杨酸溶液。 将甲液与乙液相混合即得黄色试剂,贮于棕色试剂瓶中。在室温下,放置7—10天以后使用。 (2)0.1%葡萄糖标准液:准确称取100毫克分析纯的葡萄糖(预先在105℃干燥至恒重),用少量蒸馏水溶解后定容至100毫升,冰箱保存备用。 (3)6N盐酸溶液。 (4)10%氢氧化钠溶液。 (5)碘化钾-碘溶液(碘试剂)。
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