第三章 毛细管电泳法 姚彤炜 概述 毛细管电泳又叫高效毛细管电泳 (HPCE),是80年代初发展起来的一种新型分离分析技术,它是电泳技术与层析技术相结合的产物 广泛用于生物大分子,手性药物,生物体内的药物及代谢物,中西药物及其制剂等的分析,在选择性上与高效液相法有很大的互补性 被多国药典收载,如2010年版中国药典对盐酸头孢吡肟中N-甲基吡咯烷的检查,USP对盐酸罗哌卡因的对映体纯度检查,均采用毛细管电泳法测定 一、基本原理 高效毛细管电泳以高压电场为驱动力,以毛细管为分离通道,依据各组分之间的迁移速度和分配行为上的差异而实现分离的一类技术 在毛细管电泳中有两个重要的迁移: 电泳迁移 电渗流迁移 电泳迁移 在电场作用下,带电组分作定向移动。其迁移速度(?)可用下式表示: ? = ?eE (1) ?e为电泳淌度 E为电场强度(V/L)——是外加电压和毛细管长度的函数 电泳迁移原理 对于给定的离子和介质,淌度?e为离子的特征常数,其大小取决于分子所受的电场力FE和其通过介质时的摩擦力FF的平衡: FE = qE (q为离子电量) FF= -6??r? (? 溶液粘度, r 离子半径, ? 离子速度) 达到平衡时,两种力大小相等而方向相反,即 qE =6??r? (2) 电泳迁移原理 根
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