《免疫试验1.ppt

抗原抗体反应的特点 1. 抗原与抗体的结合是特异性的 ﹡交叉反应 2. 抗原抗体结合是可逆的 引力：氢键、疏水键、静电引力、范德华力 斥力：电子云产生的排斥力 3. 抗原抗体反应可分为两个阶段 抗原抗体特异性结合阶段 可见反应阶段 4. 抗原抗体的分子比例与抗原抗体结合是否呈现可见的反应现象密切相关 抗体过剩区 抗原-抗体反应受多种因素影响 电解质：抗原-抗体反应通常应用0.85%的氯化钠作为稀释液 ，以供给适应浓度的电解质。 温度：一般常使反应在37度水浴或孵育箱中进行。 酸碱度：抗原-抗体反应适应的酸碱度为PH6~8。 凝集反应(Agglutination) 细菌、红细胞等颗粒性抗原或吸附于颗粒上的可溶性抗原（或抗体）中加入相应抗体（或抗原），在电解质存在的条件下形成凝集物的现象，称为凝集反应。 凝集反应的分类 直接凝集反应 间接凝集反应 间接凝集抑制试验 协同凝集试验 抗球蛋白试验 直接凝集试验（Direct Agglutination） 细菌或红细胞等颗粒性抗原与相应的抗体直接反应，出现细菌凝集或红细胞凝集现象。 1. 玻片法：定性试验 菌种鉴定及血型鉴定 2. 试管法：半定量试验 抗体效价滴定 间接（被动）凝集反应（Indirect/Passive Agglutination） 将可溶性抗原（或抗体）吸附于一种与免疫无关的、一定大小的载体表面，然后与相应抗体（或抗原）作用，在电解质存在的条件下出现凝集现象。 间接凝集抑制试验（Indirect Agglutination Inhibition） 可溶性抗原与相应抗体充分作用后，再加入抗原致敏的载体颗粒，此时因抗体已被可溶性抗原结合，不会再出现载体凝集现象。 协同凝集试验（Coagglutination） 金黄色葡萄球菌细胞壁中的A蛋白（SPA）能与人及哺乳动物血清中IgG类抗体的Fc段结合。IgG的Fc段与SPA结合后，其Fab段与特异性抗原结合出现特异的凝集现象。 检测血液、脑脊液及其他分泌液中的微量抗原。 抗球蛋白试验（Antiglobulin Test，Coomb‘s Test） 某些血球凝集反应，如Rh＋红细胞与抗Rh抗体的反应，因抗体为IgG，结合价为两价，与IgM相比，分子较小，抗体与红细胞间的结合力不能克服细胞间的排斥力，不出现红细胞凝集现象。若加入抗IgG的抗体，则可以在包被了Rh抗体的红细胞之间建立数量较多、距离较远、因而排斥力较小的联接，引起凝集现象。 双向免疫扩散 （Double Immunodiffusion) 在琼脂板上按一定距离打两个小孔，将抗原与抗体分别加入琼脂凝胶的小孔中，二者自由向周围扩散并相遇，在比例合适处形成沉淀线。如果反应体系中含两种以上的抗原抗体系统，则小孔间可出现两条以上的沉淀线。 本法常用于抗原或抗体的定性 、组成的检测。 单向免疫扩散(Single Immunodiffusion) 将一定量已知抗体混于琼脂凝胶中制琼脂板，在适当位置打孔后将抗原加入孔中扩散。抗原在扩散过程中与凝胶中的抗体相遇，形成以抗原孔为中心的沉淀环，环的直径与抗原含量成正比。 本法常用于测定血清IgG、IgM、IgA 和 C 3等的含量。 对流免疫电泳(Counter Immunoelectrophoresis) 在电场中进行的双向免疫扩散。 电渗：电场中溶液相对于固体的移动。琼脂是酸性物质，在碱性溶液中带负电，而与它接触的溶液带正电，因此液体向阴极移动。 免疫电泳(immunoelectrophoresis) Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for