050第五章细胞融合与单克隆技术.ppt

第五章 细胞融合与单克隆抗体 细胞融合实际上包含多个过程：首先是两个亲本细胞并列，以后膜组织局部破坏，最终形成包围融合细胞的连续胞膜。融合细胞表现的特征性变化，有膜成分和胞质成分的交流以及细胞内电导率的连续性。 抗体的主要类型与结构： ? IgG由4条多肽组成(两条轻链和两条重键) ，通过二硫键和非共价键相连，其分子结构如“Y”型。一端为抗原结合端(氨基端)——可变区(V区)，即氨基酸顺序随免疫的抗原不同而异，有两个相同的能与抗原结合的部位。另一端(羧基端)氨基酸顺序排列比较恒定——恒定区(C区)，可与具有Fc受体的细胞相结合(如巨噬细胞、K细胞、肥大细胞等)，分别产生不同的效应。 IgG抗体结构模型（红色部分为CDR区域） 抗体与抗原的特异性结合 HAT系统为次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)的缩写。它是根据嘌呤和嘧啶生物合成途径设计的分离杂种细胞特殊的培养基。 细胞内核苷酸的生物合成有两条途径： 一条是主要途径，该途径中叶酸及其衍生物是必不可少的，氨基喋呤可抑制二氢叶酸还原酶活性，从而阻断细胞中DNA的合成； 另外一条是补救途径，该途径需要两种酶参与。一种是HGPRT酶(次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶) ，另一种酶是TK酶(胸腺嘧啶核苷激酶) 。它们可以分别利用次黄嘌呤催化产生的肌苷酸及胸腺嘧啶核苷催化产生的脱氧胸苷来合成DNA。 H、T为