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- 2016-12-27 发布于江苏
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LOGO 病毒采集 自感染性传支病鸡的许多组织中分离出来,较好的病料样品是气管、肺和肾。(1)器官的处理将气管样品横向剪成1~2mm宽,放进无菌的离心管中,约加3ml含有抗生素的缓冲盐水,剧烈摇动3min,在室温静置10min,取上清液用于病毒分离。(2)气管黏液的处理剪下整根气管,平放于无菌的平皿表面,用剪刀纵向剪开气管,以刮刀刮下气管内的黏液,将黏液放进含有0.5ml抗生素缓冲液盐水中,剧烈摇动30s,即可用于病毒的分离。(3)组织的处理将肺、肾、输卵管或盲肠扁桃体等组织经玻璃研磨器或乳钵磨成匀浆,用含有抗生素的缓冲盐水制成10%乳剂。经2000r离心10min,上清液可用于病毒分离。(4)泄殖腔棉拭的处理将棉拭剪下,放入无菌试管内,加适量抗生素的缓冲盐水,反复摇动静置后可取液体用于病毒的分离。 LOGO 病毒分离 采集感染初期的气管拭子或感染1周以上病鸡的泄殖腔拭子,经无菌处理后接种于9~11日龄鸡胚尿囊腔或鸡胚气管组织培养物中,48~72h后分别收获培养液,至少盲传4代,根据鸡胚的特征性死亡(僵化胚)或气管纤毛运动停止,即可证明有病毒存在。用原始样品或第1代组织培养液接种于易感小鸡,18~36h即可出现典型的呼吸道症状。 LOGO 血清学诊断 中和试验和血凝抑制试验是目前用于传支病毒血清学分型的方法,荧光抗体技术、琼脂扩散试验和酶联免疫吸附试
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