第十一章 基因突变.pptVIP

例： 5-BU是胸腺嘧啶(T)的结构类似物，酮式结构易与A配对，烯醇式结构易与G配对。 一、 碱基类似物 第二节 点突变的诱变机制 A?T→A?5-BU(酮式)→G?5-BU (烯醇式)→G?C ↘T?A ↘A?T ↘ A?5-BU(酮式) G?C →G?5-BU (烯醇式)→A?5-BU(酮式)→A?T ↘C?G ↘G?C 2-AP（2-氨基嘌呤）是腺嘌呤的类似物，既可与T配对，也可与C配对。 A?T→ 2-AP?T→2-AP?C→G?C G?C→2-AP?C→ 2-AP?T → A?T （1）烷化剂: 甲磺酸乙酯(EMS)、亚硝基胍(NG)等。通过改变碱基结构使碱基错配。当G烷基化后可与T配对，导致碱基转换。 G?C→A?T。 或：烷化剂使嘌呤脱落，造成转换、颠换；DNA链的断裂或交联。 二、 碱基改变 （2）嵌入剂 例： 吖啶橙、吖啶黄素、原黄素等碱基对的类似物，易造成移码突变。 （1）紫外线： 产生环丁烷嘧啶二聚体和6-4光产物。 ①双链间形成，阻碍DNA的复制。 ②同一链上相邻T间形成，阻碍碱基的正常配对和 腺嘌呤的正常掺入，使复制在这个点上停止或错 误进行，产生碱基顺序改变了的新链。 三、 碱基损伤 （2）黄曲霉(B1)的作用 使鸟嘌呤G脱落，SOS修复引入A, 造成G?C→A?T。 四、 基因的定点突变 1）寡核苷酸诱导的基因定点突变 将某基因克隆到载体上→人工合成含有突变位点的一对引物（突变位点位于引物中心附近，两端有足够的序列足以互补配对）→PCR扩增→将突变DNA转入受体→筛选重组子。 2）双引物法（重叠延伸技术） 将某基因克隆到载体上→人工合成一对互补的含有突变碱基的引物→在基因的上游和下游各设计一个引物，分别与突变位置处的一个引物进行PCR扩增→两个PCR产物混合→延伸后就可获得有特定位点突变的基因。 第三节 自发突变的机制 一、 DNA复制错误(errors of DNA replication) a 转换 b 颠换 A T G C C 移码突变：增加或减少一个或几个碱基对的突变，引起密码编组的移动。 d 缺失和重复突变　 e 插入突变 （转座子） 二、自发损伤 a 脱嘌呤：碱基和脱氧核糖间的糖苷键受到破坏，从而引起一个鸟嘌呤或腺嘌呤从DNA分子上脱落下来。 b 脱氨基：如胞嘧啶Ｃ脱氨基后变成尿嘧啶Ｕ。U?A, 结果G?C→A?T。 三、 氧化损伤： O2-，OH-，H2O2可对DNA造成损伤。 第四节 动态突变 在基因的编码区、3’或5’非编码区、启动子区、内含子区出现的三核苷酸重复，及其他长短不等的小卫星、微卫星序列的重复拷贝数，在减数分裂或体细胞有丝分裂过程中发生扩增而造成遗传物质的不稳定。亦称为基因组的不稳定性，可造成基因功能丧失或获得异常改变的产物。 第五节 DNA损伤修复机制 DNA的防护机制 ①密码子的简并性 ②回复突变 ③抑制突变 ④致死选择 ⑤多倍体 DNA损伤的修复 DNA损伤是经常发生的 细胞具有多重、复杂的DNA损伤修复系统。 许多损伤类型具有多种修复途径 一个修复途径可以修复多种损伤类型 一、光复活(photoreactivation)（原核） １.概念：可见光存在的条件下，在光复活酶作用下将UV引起嘧啶二聚体分解为单体的过程。 ２.过程 ①光复活酶与T=T结合形成复合物; ②复合物吸收可见光切断T=T之间的C-C共价键, 使二聚体变成单体; ③光复活酶从DNA链解离。 胸腺嘧啶二聚体的形成 胸腺嘧啶二聚体的光修复光复活酶在黑暗中识别二聚体在蓝色光条件下，有一种光激活酶可以将TT二聚体切开，使DNA结构恢复正常。光修复就是直接修复 二、 切除修复（核苷酸外切修复、暗修复） （excision-repair） 在DNA内切酶、DNA聚合酶、外切酶、DNA连接 酶等共同作用下，不依赖于光，将DNA受损部位部分 切除，并以其中一条链为模板，合成修复。 消除由UV引起的损伤，也能消除由电离辐射 和化学诱变剂引起的其他损伤。切除的片段可由 几十到上万bp，分别称短补丁修复、长补丁修复。 切除修复（暗修复） 原核生物切除12bases 真核生物切除28bases 三、错配修复系统（mismatch repair system） 修复杂种DNA错配碱基及基因转变。 四