@2第二章培养基及制备.ppt

e.g. 青霉素发酵中加玉米浆发酵单位由20U/mL提高到40U/mL 。 　　玉米浆中含有苯乙胺，它被优先结合到青霉素分子中去，从而提高产量。 　　有些前体物质，例如苯乙酸、丙酸等浓度过高时，对菌体会产生毒性。有些菌体还有将前体氧化分解的能力。 　　在生产中常采用少量多次地加入前体。 总的加入量可按一个产物分子，进入几个前体分子，按等摩尔计算前体加入量，在总的加入量中，还应考虑菌体氧化、分解的那部分前体。  产物 前体 　 产物 前体　 青霉素Ｇ　苯乙酸及衍生物 青霉素Ｖ　苯氧乙酸 金霉素　　氯化物 链霉素　 肌醇、精氨酸 红霉素　 丙酸、丙醇　　 VB12 钴化物 葫萝卜素 ?-紫罗兰酮 L-异亮氨酸 ?- 氨基酸 L-色氨酸 邻氨基苯甲酸 L-丝氨酸 甘氨酸 　　抑制剂（inhibitor）： 在发酵过程中能产生抑制作用的物质 抑制剂（inhibitor）： 孢子培养基 要求：促进菌体迅速生长，产生较多优质孢子且不会引起菌种变异。 特点 C、N源不宜多，否则只长菌丝，少长或不长孢子； 无机盐浓度要适当控制，否则会影响孢子的颜色和孢子量。 种子培养基 目的 扩大培养增加细胞数量；培养高活力细胞；加速细胞分裂或菌丝生长 要求 营养丰富、完全，氮和维生素的含量高些； 培养基中加入一些易于吸收利用的快C、N源，便于孢子发芽生长，保证球形； pH要稳定； 最后一级尽可能接近发酵培养基，常加入少量发酵合成期才大量需要的物质。 发酵培养基 目的：使接种菌丝生长并能高效表达，获得高的发酵产量，同时组分尽可能单一，以保证高的得率。 要求 营养丰富完全，有利于产物合成； 不能大量加入快C、快N源，应和慢C、N源相结合； 在产物分泌期间，pH 稳定； 加入适量合成所需的物质，如前体等，进行定向发酵； 采用中间补料，以提高发酵单位； 原料的考虑——成本问题 三、工业培养基选择 能够满足生产菌生长、代谢需要 目的代谢产物的产量最高 利于提高培养基和产物的浓度以提高生产能力 利于提高产物合成的速度，缩短发酵周期 减少副产物的形成便于分离纯化 原料低廉，质量稳定，取材容易 原料减少对通气搅拌的影响，提高氧利用率，降能耗 来源广泛且供应充足 利于产品分离纯化，减少产生三废物质 废物的综合利用能力强且容易处理 四、培养基的配制原则 提供必要的营养成分 配制合适的浓度 主成分和其他成分的配比 控制合适的pH 添加有关前体物质和诱导物 阻遏物或抑制剂的影响 金属离子的影响 ㈠、培养基成分的选择原则 1.菌种的同化能力 2.代谢的阻遏和诱导作用 3.合适的碳氮比 4.pH的要求 表3-1 Plackett–Burman设计筛选影响Y-21生长的关键培养基组分 表3-2 Plackett–Burman设计12次试验确定9种变量的影响 用SAS软件分析试验结果 用SAS软件分析试验结果 当P值小于0.05时，为影响显著因素，通过表可以看出X1蔗糖，X2蛋白胨，X3酵母膏，X8磷酸二氢钾，X9硫酸镁 的值均小于0.05，其数据的R2检验为99.65%，表明可信度为99.65%。 第五节 淀粉的制备葡萄糖工艺 一、淀粉的组成及特性 1、淀粉的组成 (C6H10O5 )n 聚合度 直链淀粉和支链淀粉 淀粉颗粒的构成如下图： 氢键 聚集 淀粉分子链 ───→ 针状晶体 ───→ 淀粉颗粒 2、淀粉的特性 淀粉的膨胀和溶解 膨胀：淀粉是一种亲水胶体，遇水加热后，水分子渗入淀粉颗粒的内部，使淀粉分子的体积和重量增加，这种现象称为膨胀。 糊化：在温水中，当淀粉颗粒无限膨胀形成均一的粘稠液体的现象，称为淀粉的糊化。此时的温度称为糊化温度。 二、淀粉制备葡萄糖的方法和原理 　工业上，将淀粉水解成葡萄糖的过程称为淀粉的糖化。 ㈠、淀粉的糖化 1，糖化理论 糖化：以无机酸或酶为催化剂，在一定温度下使淀粉水解，将淀粉全部或部分转化为葡萄糖等可发酵性糖的过程。 糖化剂 ：糖化过程中所用的催化剂。包括无机酸和酶。 糖化的目的：将淀粉转化为可发酵性糖。 ㈠、淀粉的糖化 （1）酸解法（酸糖化法） 定义：以酸（无机酸或有机酸）为催化剂，在高温高压下将淀粉水解为葡萄糖的方法。 淀粉水解过程的反应 主反应：糖化（水解作用） 副反应： 复合反应（在酸和热作用下，部分葡萄糖经β-1