2.2第二章染色体与dna.ppt

基因组复制与细胞分裂的关系 细胞在每次分裂的过程中，整个基因组都必须精确地复制一次。 如何保证这一点？两个原则 (1) DNA复制的启动决定了细胞的进一步分裂; (2) 复制过程完成前，细胞是不会发生分裂的。 DNA dependent DNA polymerase——DDDP DNA dependent RNA polymerase——DDRP RNA dependent RNA polymerase——RDRP RNA dependent DNA polymerase——RDDP 质粒一般是一个自主环状的DNA基因组，构成一个独立复制子； 原核生物基因组中一般只含一个复制子，在唯一的起始点启动就会引起整个基因组复制； 真核生物基因组含多个复制子（一般40-100kb/个）。 注：在每个细胞周期中，每个复制子发生一次复制，且只发生一次。 复制眼概念 复制叉移动方向的确定 3 DNA复制的几种形式 3.1 线性DNA双链的复制 3.2 环状DNA双链的复制 3.1 线性DNA双链的复制 3.1.1 线性DNA复制的具体表现 3.1.2 线性DNA复制时末端问题的提出 3.1.3 线性DNA复制时末端问题的解决方案 DNA复制的一般过程 DNA双螺旋走向是5′→3′, 3′→5′方向，DNA聚合酶只能催化DNA从5′→3′的方向合成。在以3′→5′方向的母链为模板时，复制合成出一条5′→3′方向的前导链(leading strand)，前进方向与复制叉打开方向是一致的，因此前导链的合成是连续进行的。 3.1.1 线性DNA复制的具体表现 3.1.2 线性DNA复制时末端问题的提出 3.1.3 线性DNA复制时末端问题的解决方案 (1）通过将线性复制子转变为环状或多聚分子。如T4和λ噬菌体：滚环产生多聚复制子）； (2）某种蛋白质可能会介入，在真正的末端上启动。几种线性病毒核酸具有与5`端碱基共价结合的蛋白质，其中了解最清楚的例子是腺病毒（adenovirus ）DNA，φ29噬菌体DNA和脊髓灰质炎病毒RNA)。 (3）DNA可形成特殊的结构，如在末端形成发夹。使分子没有游离末端。草履虫（Paramecium）的线性线粒体DNA的复制中就形成了一种交联； (4）末端是可变的，而不是精确确定的。真核生物染色体可能采用这种方式，在这种情况下，DNA末端的短重复序列的拷贝数改变（如端粒的复制）； 3. 2 环状DNA的复制 3.2.1 θ-复制 replication by θ-structure Figure 13.8 The catalytic domain of a DNA polymerase has a DNA-binding cleft created by three subdomains. The active site is in the palm. Proofreading is provided by a separate active site in an exonuclease domain. Figure 13.6 Bacterial DNA polymerases scrutinize the base pair at the end of the growing chain and excise the nucleotide added in the case of a misfit. 在原点链分开起始。 DnaA 单体结合在9bp重复位置，然后链弯曲,DnaA与13bp重复位置结合，DNA链在13bp重复位置分开，DnaB/DnaC加入进复合体，形成复制叉。 ΦⅩ174滚环复制的起始区含有30nt的保守顺序，构成A蛋白的识别位点、结合位点和A-T丰富区。 A蛋白由ΦⅩ174自己编码。 A蛋白识别Ori的特殊序列后诱导A-T丰富区的解链，并在正链的第4305－4306nt之间切断磷酸二酯键，产生3’－OH和5’－P，A蛋白的Tye的－OH与5’端的nt(A)形成磷酸脂链，结合于上。 成环滚环 新环为单链环 滚环复制，成多聚体，再切割 成环，新环为双链环 真核生物由不同DNA聚合酶分别负责起始和延伸 三种细胞核DNA复制酶具有不同的功能: DNA polymerase α 起始新链合成 DNA polymerase δ 延伸先导链 DNA polymerase ε 可能与后随链合成有关，也可能具有其他功能 Nature：科学家用大肠杆菌创造出“遗传时钟” 美国科学家在一项最新研究中，利用合成生物学方法，成功创造出了首个稳定、快速、可调的“遗传时钟”，它通过单个大肠杆菌细胞内部