7 发酵过程控制.ppt

发酵终点的判断 发酵类型的不同，要求达到的目标也不同，因而对发酵终点的判断标准也应有所不同．对原材料与发酵成本占整个生产成本的主要部分的发酵品种，主要追求提高产率，得率和发酵系数．如下游提炼成本占主要部分和产品价值高，则除了高产率和发酵系数外，还要求高的产物浓度． 种子包括进罐前菌种室阶段出问题 培养基的配制和灭菌不彻底 设备上特别是空气除菌不彻底和过程控制操作上的疏漏 （2）溶解氧控制作为发酵中间控制的手段之一 控制原理 发酵过程中， 糖量↑→ x ↑, QO2 ↑ → γ ↑ → CL↓ 糖量 ↓ → QO2 ↓ → γ ↓ → CL ↑ 补糖使CL下降，而CL回升的快慢取决于供氧效率。 对于一个具体的发酵，存在一个最适氧浓度（Cm）水平，补糖速率应与其相适应。 ，加大补糖速率 ，减小补糖速率 实现用溶解氧水平控制补料速率 补糖速率控制在正好使生产菌处于所谓“半饥饿状态”，使其仅能维持正常的生长代谢，即把更多的糖用于产物合成，并永远不超过罐设计时的KLa水平所能提供的最大供氧速率。 控制原则 （2）溶氧控制作为发酵中间控制的手段之一 控制方法 溶氧和补糖控制系统 溶氧和pH控制的系统 （2）溶氧控制作为发酵中间控制的手段之一 （3）溶解氧控制的工艺方法：从供氧、需氧两方面考虑 供氧方面： 提高氧分压（氧分含量），即 ，提高供氧能力 改变搅拌转速：通过改变KLa来提高供氧能力 通气速率Ws ↑：Ws增加有上限，引起“过载”、泡沫 提高罐压： ，但同时会增加CO2的溶解度，影响pH及可能会影响菌的代谢，另外还会增加对设备的强度要求。 改变发酵液理化性质（σ， ，Ii） 加消泡剂，补加无菌水，改变培养基成分→改变KL 改变温度： 提高推动力（C*－CL） （3）溶解氧控制的工艺方法（续） 耗氧方面 限制性基质的流加控制（补料控制）：在OTR一定情况下，控制基质浓度→限制μ、x→ 限制γ →控制溶解氧 （六）CO2和呼吸商对发酵的影响及其控制 1. 定义 2. 发酵过程中CO2释放率的变化 3. CO2对发酵的影响 1. 定义 呼吸商（RQ）：指菌体呼吸过程中，CO2释放率和菌的耗 氧速率之比，RQ反映菌的代谢情况。 菌体耗氧速率 OUR，molO2/L·h 菌体CO2释放率CER，molCO2/L·h （1）影响尾气中CO2浓度的因素 通入空气量： 呼吸强度： CO2溶解度： 菌体量： （2）CER变化规律 CO2积累量渐增，与x曲线对应，基本类似S型曲线变化； 当工艺和设备参数一定的情况下，CER与x有比例关系（CER∝菌体生长速率）； CO2浓度变化与O2浓度变化成反向同步关系。 ∫[CER]dt，菌体干重的时间曲线 1- [CER]dt；2-菌量 （2）CO2对细胞的作用机制 “麻醉”作用 CO2及HCO3-都会影响细胞膜的结构，使膜的流动性及表面电荷密度发生变化，导致许多基质的跨膜运输受阻，影响了细胞膜的运输效率，使细胞处于“麻醉”状态，细胞生长受到抑制，形态发生改变。 （3）CO2对菌体生长及产物形成的影响 CO2↑, 基质分解速率↓，ATP ↓ ，中间产物↓或形态变异导致产量↓ 高浓度CO2抑制作用的独立性: 只要CO2在培养液中浓度过量，即使供氧充足（CLCCr），CO2的抑制作用不能解除，这种负作用在放大过程更明显。 正确评价通气的作用： 供氧： 排废气： 水分及挥发性组分的散失 (2) 基质浓度对产物合成的影响 低浓度限制 低水平诱导 高浓度抑制及分解阻遏作用 e.g.葡萄糖氧化酶发酵：葡萄糖用量从8%降至6%，补入2%氨基乙酸或甘油，使酶活力分别提高26%或6.7%。 谷氨酸发酵（乙醇为碳源）：当乙醇浓度为2.5g/L和35g/L时，可延长谷氨酸生产时间，但在更高浓度下，菌体生长受到抑制，谷氨酸产量降低。 泡沫的不利影响 降低了发酵罐的装料系数 增加了菌群的非均一性 增加了染菌机会 大量起泡引起“逃液”，导致产物的损失 泡沫严重时会影响通气搅拌的正常进行 消泡剂的加入将给提取工序带来困难 1. 泡沫的产生及其影响 （1）机械消泡 原理：靠机械力引起强烈振动或者压力变化，促使泡沫破裂，或借机械力将排出气体中的液体加以分离回收。 优缺点 优点：不需引入外来物质，可节省原材料，减少 污染机会，并可减少培养液性质复杂化的程度。 缺点：不如化学消泡迅速可靠，需要一定的设备和消耗一定的动力；不能从根本上消除引起稳定泡沫的因素 （2）化学消泡 消泡机理