2012第三章酶.ppt

第四章 酶 目 录 酶的研究历史 酶的发现和提出：1897年，Buchner兄弟用 不含细胞的酵母汁成功实现了发酵。提出了发酵与活细胞无关，而与细胞液中的酶有关 1913年，Michaelis和Menten提出了酶促动力学原理—米氏学说 1926年，Sumner从刀豆种子中分离、纯化得到了脲酶结晶，首次证明酶是具有催化活性的蛋白质 1928年，Cech对四膜虫的研究中发现RNA具有催化作用 一.酶（Enzyme）的概念 酶是一类具有催化功能的生物大分子，亦称为生物催化剂Biocatalysts 绝大多数的酶都是蛋白质 酶催化的生物化学反应，称为酶促反应Enzymatic reaction。 在酶的催化下发生化学变化的物质，称为底物substrate 2.酶的作用特点 （1） 酶和一般催化剂的共性 用量少而催化效率高； 它能够改变化学反应的速度，但是不能改变化学反应平衡。酶本身在反应前后也不发生变化; 酶能够降低反应的活化能，从而加速反应的进行 只能催化热力学允许进行的反应 （2）酶作为生物催化剂的特性 ①酶具有很高的催化效率，酶的催化作用可使反应速度提高10７ –101３倍酶比化学催化剂效率要高106-1012倍 酶的催化作用具有高度专一性 酶的专一性 Specificity又称为特异性，是指酶在催化生化反应时对底物的选择性，即一种酶只能作用于某一类或某一种特定的物质。亦即酶只能催化某一类或某一种物质发生某一类化学反应 例如：蛋白酶催化蛋白质的水解；淀粉酶催化淀粉的水解；核酸酶催化核酸的水解;脂酶催化脂类水解；但它们都可以用酸碱进行水解 酶的催化活性易受外界条件的影响 酶促反应一般在pH 5-8 水溶液中进行，反应温度范围为20-40?C。 高温或其它苛刻的物理或化学条件，将引起酶的失活。 酶的催化活性在细胞内受到严格的调节控制 如抑制剂调节、共价修饰调节、反馈调节、酶原激活及激素控制等 例如反馈调节 一条代谢途径的终产物，有时可与该代谢途径的第一步反应的酶相结合，结合的结果使这个酶活性下降，从而使整条代谢途径的反应速度慢起来。这种情况称为“反馈抑制 ”。 发生反馈抑制时，代谢终产物与酶结合时，是非共价结合，是可逆的 酶的催化活性与辅因子有关 辅因子：有些酶是复合蛋白质，由酶蛋白和非酶蛋白小分子物质组成，这些非打败分子物质称为辅因子，若将他们除去，酶就失去活性。 酶及生物催化剂概念的发展 二、酶的专一性 绝对专一性和相对专一性 消化道内几种蛋白酶的专一性 消化道蛋白酶作用的专一性 三、酶的化学本质及类别 第二节 酶的命名和分类（略讲） 第三节 酶的作用机理 酶催化的中间产物理论 酶作用专一性机理 酶专一性的“锁钥学说” 酶专一性的“诱导契合学说” 四、与酶的高效率有关的主要因素 酶分子中可作为亲核基团和酸硷催化的功能基团 胰凝乳蛋白酶分子中催化三联体构象 胰凝乳蛋白酶反应的详细机制（1） 胰凝乳蛋白酶反应的详细机制（2） 酶的活性中心和必需基团 胰凝乳蛋白酶的活性中心 羧肽酶活性中心示意图 第四节 影响酶促反应速度的因素 一、酶反应速度的测量 二、酶浓度对酶作用的影响 三、底物浓度对酶促反应速度的影响 酶反应速度与底物浓度的关系曲线(条件:[E];pH;t等条件固定不变) 2.米氏方程及Km 米氏方程的推导 3、米氏常数的意义和测定 米氏常数的测定 酶动力学的双倒数图线 4、pH对酶促反应速度的影响 5、温度与酶反应速度的关系 6、激活剂对酶作用的影响 7、抑制剂对酶作用的影响 抑制剂类型和特点 竞争性抑制作用 竞争性抑制曲线 非竞争性抑制作用 非竞争性抑制曲线 竞争性非竞争性抑制作用机理示意图 反竞争性抑制作用 反竞争性抑制曲线 非专一性不可逆抑制剂 专一性不可逆抑制剂 第五节 酶的活性调节 一、酶的别构（变构）效应 酶的别构（变构）效应示意图 别构酶的动力学曲线 ATCase的结构及其催化链的别构过度作用 别构酶的序变模型 别构酶的齐变模型 二、酶的多种分子形式——同工酶 乳酸脱氢酶同工酶形成示意图 不同组织中LDH同工酶的电泳图谱 第六节、酶活力测定方法  酶活力的表示方法 酶 原 的 激 活 胰蛋白酶原的激活示意图 第六节 酶工程简介 固定化酶 溴化氰亚氨碳酸基偶联法 戊二醛交联法 酶的改造和模拟 人工模拟酶?-benzyme 生物酶工程示意图 第七节 维生素和辅酶 重要的水溶性维生素及相应辅酶 主要可溶性维生素和相应辅酶 1、维生素B1和焦磷酸硫胺素（TTP） 2、维生素B2和黄素单核苷酸（FMN）.黄素腺嘌呤二核苷（FAD） 3、泛酸和 辅酶 A（CoA） 4、维生素