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1989年，童第周、牛满江将鲫鱼胚胎细胞核移入鲤鱼去核的未受精卵中，实现了不同种间的核质杂交，成功地无性繁殖了“鲤鲫核鱼”新品种 1981年，瑞士日内瓦大学和美国杰克逊实验室合作，首次对小鼠卵进行移核试验获得成功 体细胞核移植技术（体细胞克隆） 细胞的发育潜能 由一个细胞可能分化发育出多少种细胞？这就是细胞的发育潜能 全能性：具有能使后代细胞形成完整个体的潜能的细胞称全能性细胞（受精卵） 多能性：具有分化出多种组织或细胞（但是不能形成完整个体）的潜能的细胞称多能性细胞（多能干细胞） 单能性：只能分化成一种细胞的干细胞称单能干细胞 （单能/定向干细胞） 所有体细胞核均保持着全套基因组 ★ 对于植物来说，分化成熟的植物细胞体，仍保持全能性，仍有可能发育成完整植株 ★ 对于动物来说，随着分化的演进，细胞逐渐丧失其分化潜能（全能性 多能性 单能性 分化成熟的体细胞） 分化成熟的动物细胞已失去全能性，不可能发育成完整的动物个体 问题 我们能否利用类似植物组织培养获得完整植物体的方法培养动物细胞，使其发育成一个完整的个体？ 不能！高度分化的植物细胞仍保持着全能性，而动物细胞的全能性会随细胞分化程度的提高逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱。所以目前还不能利用类似植物组织培养的方法获得完整的动物体 ? 胚胎克隆实验证实：囊胚阶段的胚胎细胞，其细胞核仍具有全能性，可能发育成完整个体 ? 细胞质中有着决定细胞分化全能性的物质，称为分化决定子，可能是 RNA ? 在卵子形成过程中，卵母细胞中含有 2－5 万种 mRNA，每种约 600个拷贝。这些 RNA 构成母体信息，决定受精卵的发育潜能 ? 体细胞核中含全套基因组，在卵细胞质中有可能恢复全能性 体细胞核移植技术的方法 体细胞核移植技术类似于胚胎核移植技术，但技术难度、意义和应用价值相距甚远 基本原理：体外通过物理的或化学的方法激活体细胞核基因组，使之恢复到全能状态，然后植入去核卵细胞中，组装成“类卵细胞”，植入代孕母体发育成新个体 体细胞克隆的具体过程（以多利羊为例） 第一步 取妊娠期的6岁母绵羊（Finn Dorset白色母羊）的乳腺细胞作核供体细胞，用饥饿法使其进入休眠状态而使全部基因具有活性 第二步 　　注射促性腺激素，促使母羊（Sottish Blackface黑面母绵羊）排卵，28~33小时取其未受精卵，快速去核，放入10%FCS、1%FCS和0.5%FCS连续5天，使其进入G0期做受体细胞 第三步 　　乳腺细胞与无核卵放入同一培养皿中，在微电流的作用下，将乳腺细胞融入卵中，形成一个含有新的遗传物质的卵细胞 第四步 　　新的卵细胞植入羊的结扎的输卵管内，6天后发育为桑椹胚或囊胚（8-16个细胞） 第五步 　　将此早期胚胎移入假孕母羊（黑面）子宫中，产下多利即为6岁母羊的复制品，也为白色 为何是突破性的工作： 第一，解决了使供体细胞与核受体细胞（去核卵细胞）同步的方法。 第二，解决了用体细胞做核供体与转基因的问题。 多利羊实验的理论意义 证实分化成熟的动物细胞核仍具全能性 证实细胞质对胚胎发育分化的决定性 异种克隆 克隆大熊猫 尽管大熊猫人工繁殖技术一次又 一次改进和提高,也有新的突破。但用有性繁殖的方法,增加数量 仍然有限,何况目前总的来看,死亡多于新生的,因此无法从根本上解决大熊猫濒临灭 绝的严峻问题 中国克隆大熊猫技术的三个关键问题，包括异种核质相容、囊胚着床和克隆个体三个阶段，前两个阶段的实验现已成功。克隆大熊猫的关键问题则是第三步，即大熊猫的胚胎能否在家猫或其他寄母的子宫中形成个体 请问：我们能被克隆吗？ 我们正在努力！ 克隆人和治疗性克隆 证明人体单个细胞的遗传物质能被诱导发育成为幼胚胎；不可能通过克隆得到完全相同的成年人 目前克隆技术尚不成熟 任何克隆动物都有基因上的缺陷 克隆牛、羊、猪、鼠都存在体形过度庞大、发育不良、免疫系统 缺陷和心肺功能不健全的问题 人类胚胎干细胞研究和治疗性克隆 在体细胞克隆技术出现之前，科学家只能通过流产、死产或人工授精的人类胚胎获取胚胎干细胞进行研究 克隆羊多利的问世，意味着人们可以通过体细胞克隆出人类胚胎，这将使获取干细胞更为容易 医生可以取病人体细胞进行克隆，从中提取干细胞，培育出遗传特征与病人完全吻合的细胞、组织或器官，如果向提供细胞的病人移植这些组织器官，这就是所谓“治疗性克隆” 如果治疗性克隆研究取得成功，病人将可以轻易地获得与自己完全合适的移植器官，不会产生排异反应 造血细胞、脑细胞、骨骼和内脏器官等都将可以更换 白血病、帕金森氏症、心脏病和癌症等疾病的患者带来生的希望 治疗性克隆 克隆人 体细胞克隆技术应用于人类疾病的治疗 细胞核移植技术的应用前景 1 加速家畜遗传改良进