第四章 产芽孢的细菌.ppt

第四章 革兰氏阳性产芽孢杆菌 夏 春 教授 中国农业大学动物医学院 预防兽医学教研室 第一节 芽孢杆菌属（Bacillus） 炭疽杆菌 B. anthracis 一、形态及染色特性 G+ 大杆菌，在人工培养基中呈竹节状长链。在感染组织的涂片中，单个或呈短链。无鞭毛。在人和动物体内或含血清和碳酸氢钠的培养基中可形成荚膜。 在氧气充足、温度适宜(25-30℃)的外界环境中或人工培养基上易形成芽胞。芽胞呈椭圆形，位于菌体中央，小于菌体的宽度。 需氧。营养要求不高，普通琼脂平板上培养24小时，产生直径2-3mm的粗糙型菌落，灰白色、干燥、无光泽、不透明、边缘不整齐，呈卷发状。 血液平板上早期无溶血环，培养24小时后有轻微溶血。 在肉汤中生长后 呈絮状卷绕成团 的沉淀生长，表 面稍混，无菌膜， 中层透明。 明胶穿刺培养 炭疽芽胞杆菌菌落表面的细胞呈曲线排列（↑）金属镀膜，×1500 炭疽芽孢杆菌的芽胞：芽胞细胞质（SMp），芽胞类核（SN），芽胞细胞膜（SM），芽胞细胞壁（SW），芽胞皮层（SCt），外芽胞膜（OSM），和芽胞壳（SC） 超薄切片，81，000 芽胞胞质体（SCp），芽胞细胞膜(SM)，芽胞细胞壁（SW）外芽胞壁（OSW），外芽胞膜（OSM），芽胞母细胞质（SMp），芽胞母细胞膜（SMM）和芽胞母细胞壁（SMW） 超薄切片，×63000 炭疽芽孢杆菌的芽孢：Ⅰ，发芽中的芽孢，芽胞壳（↑）已崩解；Ⅱ发芽的芽胞，芽胞壳和胞子囊（↑↑）均已崩解；Ⅲ，芽孢已释放，仅存芽胞囊碎片（↑↑↑）超薄切片，×28 000 “菌 影” 荚膜具有较强的抗腐败能力，当菌体因腐败而消失后，仍有残留荚膜，称为“菌影”。 二、培养特性 需氧。在含青霉素0.5IU /ml的培养基中，细胞壁肽聚糖合成抑制，形成原生质体串，称为“串珠反应”。若青霉素加至10IU/ml，则完全不能生长或轻微生长。 三、抵抗力及常用消毒剂 本菌繁殖体的抵抗力不强，常用消毒剂均能将其杀死，对青霉素等多种抗生素高度敏感， 芽孢的抵抗力特别强，干燥保存40年以上的炭疽芽孢仍有活力。炭疽芽孢对碘特别敏感，过氧乙酸、环氧乙烷、次氯酸钠等效果较好，可用于皮毛等消毒。 土壤：黑麦、三叶草等 四、抗原结构 ⒈ 荚膜多肽抗原 具有抗吞噬作用，与毒力有关。 ⒉ 菌体多糖抗原 能与特异性抗体发生反应形成环状沉淀，称为Ascoli 试验。此抗原的特异性不高，能与其它芽胞杆菌，甚至14型肺炎球菌多糖抗原发生交叉反应。 ⒊ 炭疽毒素 由保护性抗原（PA）、致死因子（LF）和水肿因子（EF）三种蛋白质形成的复合物。 实验动物 五、致病性 本菌可引致各种家畜、野兽和人类的炭疽，牛、绵羊、鹿等易感性最强，马、驼、猪、山羊等次之，犬、猫、食肉兽等则有相当大的抵抗力，禽类一般不感染。 人类对炭疽杆菌的易感性介于食草动物与猪之间. 1，致病物质：荚膜、炭疽毒素 2，所致疾病： 败血症，肠炭疽，肺炭疽，咽喉感染， 皮肤炭疽。 传播途径： 接触→皮肤炭疽， 食用→肠炭疽， 吸入→肺炭疽 皮肤炭疽 六、微生物学检查 1，标本 炭疽病畜尸体严禁剖检. 防止芽胞形成。 2，直接涂片检查 取渗出液、血液直接涂片或取新鲜组织作印片，干燥固定后革兰氏染色，若见有荚膜的典型的竹节状革兰氏阳性大杆菌，结合临床症状可以作出初步诊断。 3，涂片- 特异性荧光抗体染色法 4，分离培养与鉴定 接种于血琼脂平板和碳酸氢钠平板，培养后观察菌落形态，并作青霉素串珠试验、动物试验等鉴定。 5，血清学检查 七、防 治 病畜处理：焚烧 免疫预防 抗炭疽血清 治疗以青霉素为首选，四环素、氯霉素等有效。 第二节 梭菌属（Clostridium） 大多数为严格厌氧。 G+，能形成芽胞，芽胞直径比菌体粗大。 除产气荚膜梭菌外，均无荚膜。 能产生多种外毒素和侵袭性酶，致病性强。 本节以魏氏梭菌为主进行介绍。 产气荚膜杆菌 本菌旧名魏氏梭菌。 在自然界分节极广，可见于土壤、污水、饲料、食物、粪便以及人畜肠道等中，在一定条件下，也可引起多种严重疾病。 一、生物学特性 形态与染色 菌体直杆状，两端钝圆，0.6-2.4um ? l.3-19.0um，单在，革兰氏阳性。芽孢大圆，位于菌体中央或近端，使菌体膨胀，但在一般条件下罕见形成芽孢。多数菌株可形成荚膜。 二、培养特性 生长迅速，代谢活跃，45℃生长最好 血琼脂平板：双层溶血环 内环完全溶血-θ毒素 外环不完全溶血- α毒素 蛋黄琼脂平板：Nagler反应 牛奶培养基： “汹涌发酵”