第三章 酶(2013秋)讲述.ppt

第 三 章酶 主要内容 一、酶的分子结构与功能 1．酶的分子组成 2．酶的活性中心 3．辅酶 二、酶促反应的特点与机制 1．酶促反应的特点：高效性、特异性、对环境高敏感性，可调性 2．酶促反应的机制 三、酶促反应动力学 1．底物浓度对反应速度的影响：米-曼氏方程，Km与Vm的意义，Km 值和Vmax值的测定 2．酶浓度对反应速度的影响 3．温度对反应速度的影响 4．pH对反应速度的影响 5．抑制剂对反应速度的影响，不可逆抑制，可逆抑制 6．激活剂对反应速度的影响 7．酶活性测定与酶活性单位:概念 四、酶的调节 1．酶活性的调节：酶原与酶原激活、变构酶、酶的共价修饰与调节：概念 2．酶含量的调节：诱导与阻遏、酶降解 3．同工酶 酶的概念 目前将生物催化剂分为两类 酶、 核酶和脱氧核酶 第一节酶的分子结构与功能The Molecular Structure and Function of Enzyme  酶的不同形式 单体酶(monomeric enzyme)：仅由一条多肽链构成的酶。 寡聚酶(oligomeric enzyme)：由多个相同或不同亚基以非共价键连接组成的酶。 多酶体系(multienzyme system)：由几种不同功能的酶彼此聚合形成的多酶复合物。 多功能酶(multifunctional enzyme)或串联酶(tandem enzyme)：一些多酶体系在进化过程中由于基因的融合，多种不同催化功能存在于一条多肽链中，这类酶称为多功能酶。 一、酶的分子组成 结合酶 (conjugated enzyme) 辅助因子决定反应的种类与性质 酶蛋白决定反应的特异性 二、酶的活性中心 活性中心内的必需基团 三、同工酶 人体各组织器官中LDH同功酶的分布 肌酸激酶同功酶 肌酸激酶(creatine kinase, CK)是二聚体，亚基有M型（肌型）和B型（脑型) 脑中含CK1 （ BB型）； 骨骼肌含CK3 （MM型）； 心肌含CK2 （MB型） 第二节 酶工作原理The Mechanism of Enzyme-Catalyzed Reaction 酶与一般催化剂的共同点： 在反应前后没有质和量的变化； 只能催化热力学允许的化学反应； 只能加速可逆反应的进程，而不改变反应的平衡点. 微量便可发挥巨大的催化作用。 （一）酶促反应具有极高的效率 一种酶仅作用于一种或一类化合物，或一定的化学键，催化一定的化学反应并生成一定的产物。酶的这种特性称为酶的特异性或专一性。 通常把酶所作用的物质称为底物. 根据酶对其底物结构选择的严格程度不同，酶的特异性可大致分为以下2种类型： 绝对特异性(absolute specificity)：只能作用于特定结构的底物，进行一种专一的反应，生成一种特定结构的产物；立体结构特异性(stereo specificity)：作用于立体异构体中的一种。 。 相对特异性(relative specificity)：作用于一类化合物或一种化学键。 （三）. 表面效应(surface effect) 酶的活性中心多为疏水性“口袋”。疏水性环境可排除水分子对酶和底物功能基团的干扰性吸引或排斥，防止在酶和底物之间形成水化膜，有利于酶和底物的密切接触。 第三节 酶促反应动力学 酶促反应动力学内容 研究酶促反应速度及其影响因素。 影响因素有: 底物浓度、酶浓度、pH、温度、 抑制剂、激活剂等。 （一）米－曼氏方程式 中间 产物 V ≌ Vmax 反应处于稳态时： ES的生成速度= ES 分解速度 K1 ([E]－[ES])[S]＝K2 [ES] + K3 [ES] V = K3 [ES] （二）Km与Vmax的意义 Km值的意义 ① Km等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度 ② Km可用来表示酶对底物的亲和力 ③ Km是酶的特征性常数之一 与酶的结构、底物种类、反应条件有关，和酶的浓度无关。 Vmax的意义 Vmax: 是酶完全被底物饱和时的反应速度,与酶浓度成正比。 Vmax=K3 [ES] =K3 [E] （三）Ｋm值与Ｖmax值的测定 1. 双倒数作图法(double reciprocal plot)，又称为 林-贝氏(Lineweaver- Burk)作图法 二、酶浓度对反应速度的影响 当[S][E]，酶可被底物饱和的情况下，反应速度与酶浓度成正比。 关系式为： V = Vmax =K3 [E] 三、温度对反应速度的影响 双重影响 温度升高，酶促反应速度升高；由于酶的本质是蛋白质，温