(二)用固定化细胞发酵 1、将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2-3次。 2、 将150mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200mL的锥形瓶中,再加入固定好的酵母细胞,置于25℃下发酵24h。 〖思考8〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封? 〖思考9〗锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的? 〖思考10〗在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中,需要无菌操作吗? 酵母菌的酒精发酵需要缺氧条件。 酵母菌进行无氧呼吸产生的。 需要。 〖思考11〗这一阶段成功与否呢?怎样评价? 2、利用固定的酵母细胞发酵产生酒精,可以看到产生了很多气泡,同时会闻到酒味。 请思考P52课后练习1 1、观察发酵的葡萄糖溶液; 一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的。 酶既能与反应物接触,又能与产物分离,同时,固定在载体上的酶还可以被反复利用。 固定化酶 对环境条件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;反应后酶会混在产物中,可能影响产品质量。 催化效率高,低耗能、低污染等。 直接使用酶 不足 优点 类型 * 温故知新: 1、洗衣粉中添加________,可以更有效地清除顽渍。常用的酶制剂有____________________________四类。 2、影响酶活性的因素有_______、 ________和_________。 酶制剂 蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶 温度 酸碱度 表面活性剂 1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活; 2、溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本; 3、反应后会混在产物中,可能影响产品质量。 酶制剂存在的缺陷: 1、固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的技术(如固定在不溶于水的载体上)。 2、固定化酶技术的优点: (1)使酶既能与反应物接触,又能与产物分离; (2)固定在载体上的酶可以被反复利用。 如果你是工程技术人员,你如何解决这个问题? 高果糖浆的生产: ①生产原料 葡萄糖,葡萄糖是由淀粉转化而来。 是以酶法糖化淀粉所得的糖化液,经葡萄糖异构酶的异构作用,将其中一部分葡萄糖异构成果糖,由葡萄糖和果糖而组成的一种混合糖糖浆。 ②生产机理 ③生产流程 含淀粉的浆液 α-淀粉酶 糊精 糖化酶 葡萄糖 葡萄糖异构酶 葡萄糖的异构化 42%~45%转化成果糖 果葡糖浆 果糖和葡萄糖分离 葡萄糖再次异构化 反复多次 果糖含量70%~90% 高果糖浆 ④固定化酶技术生产高果糖浆的图示: 注意反应柱的各部分名称。 你能说出反应柱的优点吗? 反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本,提高果糖的产量和质量。 优点: 5、高果糖浆是果糖含量为42%左右的糖浆。作为蔗糖的替代品,高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病,对人的健康有利。 你能写出果糖的分子式吗? 它属于什么糖? 单糖 C6H12O6 阅读P49-50,并思考: 1、解决酶应用中存在问题的方法是? 2、这种方法的优点是什么? 3、什么是高果糖浆?使用它有何好处? 4、生产高果糖浆需要什么酶?其作用是什么?这种酶有何特点? 5、了解高果糖浆生产过程。 一、固定化酶的应用实例 6、生产高果糖浆需要葡萄糖异构酶;其作用是将葡萄糖转化为果糖;这种酶稳定性好,可持续发挥作用。 葡萄糖异构酶 果糖 葡萄糖 在生产实际中使用固定化酶技术有无不足?如有不足,怎么办? 有。一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实际中很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能进行,所以操作比较麻烦。 可采用固定化细胞技术。 二、固定化细胞技术 1、概念: 利用物理或化学方法将细胞固定在一定空间的技术。 细胞中含有一系列酶,在细胞正常生命活动的过程中,通过代谢产生所需要的代谢产物。 阅读P50思考: 2.将酶或细胞固定化的方法 将酶(或细胞)包埋在细微网格里 将酶(或细胞)相互连接起来 将酶(或细胞)吸附在载体表面上 包埋法 化学结合法 吸附法 酶和细胞固定方法的选择 ①酶适合采用化学结合 和物理吸附法固定 ②细胞适合采用包埋法固定 (1)方法 (2)原因 ①细胞个大,酶分子很小 ②个体大的细胞难以被吸附或结合而个小的酶容易从包埋的材料中漏出 3、固定化细胞常用的载体 常用的不溶于水的多孔性载体有哪些? 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等。 〖思考1〗对固定酶的作用影响较小的固定方法是什么? 吸附法。 1、酵母细胞的活化 思考: 关于酵母菌你有哪些知识? 什么是活化? 怎样活化? 应注意什么? 三、实验操作 (一)制备固定化酵母细胞 阅读P50~51思考下列问题: (1)制备
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