第3章 核酸化学课件.pptVIP

第三章 核酸化学  核酸的结构与功能 核酸的研究历史和重要性 核酸分类和分布 核酸的基本结构单位—核苷酸 5′-磷酸核苷酸的基本结构 核糖和脱氧核糖 基本碱基结构和命名 常见（脱氧）核苷酸的结构和命名 核苷酸的组成 几种稀有核苷酸 UDPG的结构 腺苷酸及其多磷酸化合物 第三节 DNA的分子结构 DNA 的一级结构 DNA一级结构的表示法 DNA酶法序列分析的原理 DNA的二级结构 DNA的双螺旋结构的形成 DNA的双螺旋模型特点 Chargaff定则（1950s,E. Chargaff发现） DNA的双螺旋结构稳定因素 DNA的双螺旋结构的意义 DNA双螺旋的不同构象 三种DNA双螺旋构象比较 DNA回文序列及几种结构形式 DNA二级结构的多样性 DNA的三级结构 DNA超螺旋结构的形成 核小体盘绕及染色体示意图 组蛋白与DNA的结合 真核生物染色体DNA组装不同层次的结构 噬菌体T2结构 动物病毒切面模式图 第四节 RNA的分子结构 RNA的一级结构 RNA的结构特点类别 tRNA 的结构 酵母tRNA Ala 的二级结构 tRNA的三级结构 tRNA 的特点 约占总RNA的10-15%，分子最小。 它在蛋白质生物合成中起翻译mRNA信息，并将相应的氨基酸转运到核糖体，参与蛋白质体的合成。 已知每一个氨基酸至少有一个相应的tRNA。 rRNA的分子结构 rRNA的分子结构 mRNA的分子结构 原核细胞mRNA的结构特点 真核细胞mRNA的结构特点 特点 约占总RNA的3%-5%，含量最少，种类最多。 成熟mRNA不含内含子，hnRNA含有。 mRNA从DNA转录遗传信息，并作为蛋白质合成的模板，决定蛋白质的氨基酸顺序。 第五节 核酸的某些理化性质及 核酸研究常用技术 一般物理性质 1. DNA白色纤维状固体，RNA白色粉末状固 体，都微溶于水，不溶于乙醇，因此常用乙醇来 沉淀DNA ； DNA溶液黏度大于RNA 。 2. DNA难溶于0.14mol/L的NaCl溶液，可溶于 1—2 mol/L的NaCl溶液，RNA则相反，可据此 分离二者。 3. 加热条件下， D－核糖＋浓盐酸＋苔黑酚 绿色 670nm D－2－脱氧核糖＋酸＋二苯胺 蓝紫色 595nm 核酸的水解 核酸分子中的磷酸二酯键可在酸或碱性条件下水解切断。 DNA和RNA对酸或碱的耐受程度有很大差别。室温条件下，DNA在碱中变性，但不水解，RNA水解。 在细胞内核酸分子受DNA酶作用。 DNA变性的特征 Tm：熔解温度（melting temperature） DNA的紫外吸收光谱 DNA的复性条件 1.将热变性的DNA骤然冷却至低温时，DNA不可能复性。即淬火。 2.将变性的DNA缓慢冷却时，可以复性。退火温度＝Tm－25℃ 3.分子量越大复性越难。浓度越大，复性越容易。此外，DNA的复性需要一定的盐浓度，也与它本身的组成和结构有关。 分子杂交的原理示意图 分子杂交的原理示意图 第六节 DNA研究进展 人类基因组计划简介（Human Genome Project，HGP） HGP取得的成就 HGP面临的挑战 DNA芯片技术简介 人类将进入生物经济时代 沉降系数（S） 问答题 Southern印迹法 肺炎球菌转化实验图解 220 240 260 280 0.1 0.2 0.3 0.4 波长（nm） 光吸收 1 2 3 天然DNA 变性DNA 核苷酸总吸收值 1 2 3 复性：变性DNA在适当的条件下，两条彼此分开的单链可以重新缔合成为双螺旋结构，其物理性质和生物活性随之恢复，这一过程称为复性。 对于热变性的DNA，在缓慢冷却的条件下可重新结合恢复双螺旋结构，称为退火。 加热 缓慢冷却 加热 缓慢冷却 探针 杂交（缓慢冷却） 变性（加热） 不同来源的DNA单链间或单链DNA与RNA之间只要有碱基配对的区域，在复性时可形成局部双螺旋区，称核酸分子杂交（hybridization）。制备特定的探针（probe）通过杂交技术可进行基因的检测和定位研究。 实例：southern印迹法 一、人类基因组计划简介 （Human Genome Project，HGP） 二、DNA芯片技术简介 （DNA chip） 该计划是美国科学家在1985年率先提出，1990年正式启动。美、英、德、法、日先后参加了此项工作，1999年我国成为 HGP的第六个成员国。 HGP旨在阐明人类基因组DNA所具有的3×109核苷酸的序列，发现所有的人类基因并阐明其在染色