Chap08细菌和噬菌体的重组教案.pptVIP

§8.1 细菌和病毒 §8.2 细菌的遗传分析 §8.3 噬菌体的遗传分析 遗传学的发展与研究材料密切相关： 性状遗传 植物（豌豆） 细胞遗传 果蝇 分子遗传 细菌和病毒 遗传学从细胞水平发展到分子水平的另一个重要原因是对基因的化学和物理结构的深入了解。 真核生物(eukaryote)原核生物(prokaryote) 原核细胞： 没有核膜和明确的核结构，没有细胞器，不进行有丝分裂和减数分裂，只通过简单的裂殖方式增殖。 遗传物质简单 一、细菌（Bacteria） 细菌是单细胞原核生物，无性分裂，生长速度快, 周期短, 20分钟一个世代. 易培养. 简单的培养基即可培养. 易突变. 且突变易鉴别. 。 细菌的表现型： 菌落形态 颜色、大小、边缘状态等 营养需求 野生型（prototroph） 营养缺陷型（auxotroph） 对药物、噬菌体和其他因素的反应 青霉素（penicillin）：pens penr 研究细菌遗传的方法 研究细菌遗传必须具备两个条件: 一是具备野生型和突变型的细菌; 二是选择合适的培养基. 不同的培养基用于培养不同类型的细菌.目前培养基的类型主要有以下3种： 基本培养基. 用于野生型细菌的培养. 完全培养基. 用于突变型细菌的培养.? 补充培养基. 用于具体突变类型的确定. 二、病毒 virus 病毒的结构很简单，只有蛋白质外壳和被外壳包裹着的核酸（遗传物质），没有自身进行代谢和分裂所必须的细胞质和细胞器，必须借助宿主细胞的代谢系统才能繁殖自己。所以，病毒都是寄生性的，它们必须生活在活细胞内。 病毒按寄主可分为： 动物病毒，植物病毒，细菌病毒。 病毒按遗传物质可分： RNA病毒，DNA病毒。 噬菌体 bacteriophage，phage 细菌病毒，是研究得比较清楚的病毒。 噬菌体侵染细菌后在均匀生长的细菌培养板上形成噬菌斑（plaque）。 根据噬菌斑的形态和生长特点可以鉴别噬菌体。 三、细菌和病毒在遗传研究中的优越性 ①世代周期短，繁殖世代所需时间短 ②易于管理和进行生物化学分析 ③是单倍体，便于研究基因的突变 ④便于研究基因的精细结构 ⑤遗传物质比较简单，用于研究基因结构、功能及表达调控机制比较方便。 ⑥可用作研究高等生物的简单模型。 W.Hayes的实验（1952） 菌株A：met-thr+leu+thi + 菌株B：met+thr-leu- thi - 接合转移DNA的能力是由细胞质中的F因子的存在所决定的，F因子也称为致育因子(fertility factor)或性因子(sex factor). 具有F因子的品系记为F+：相当于雄性。 不含F因子的品系记为F-：雌性。 接合过程示意图滚环式复制 Hfr菌株的形成及其基因转移 部分二倍体： 当Hfr菌的部分染色体进入F－细胞后，F－细胞中就成为部分二倍体（partial diploid）或部分合子（merozygote）。 新转入的DNA片断称为供体外基因子（exogenote），而受体的染色体称为受体内基因子（endogenote）。 大肠杆菌Hfr strs thr+ leu+ azis tonAs gal+ lac+ × F- strr thr- leu- azir tonAr gal- lac-的结果 根据中断杂交试验绘制的连锁图 F因子插入的位置及方向 四 重组作图 中断杂交实验只能得到距离较远的基因座排序图, 对于距离很近(两基因转移时间间距＜2分钟)的基因座只能由重组率作图.每个基因必须以相等的机会被转移, 这时的重组率才能反映相关基因间的距离. 举例，根据中断杂交实验得知lac和ade基因是紧密连锁的，就某些Hfr供体来说，ade是lac之后进入F-受体的。 a 重组体的基因型是lac＋ade＋b 重组体的基因型是lac－ade＋ 性导过程示意图 性导过程示意图 二、 噬菌体的基因重组 当两种不同的噬菌体株系共同侵染一种细菌时, 两亲本噬菌体基因组间可能发生重组, 产生重组合. 温和噬菌体侵染细菌后，有两种繁殖周期：溶菌周期（和烈性噬菌体相同）;溶源周期. 四、 转导与作图 产生上述结果的原因: ①.是否属于恢复突变? 　高频率出现不可能是回复突变。 ②.是否属于接合、性导? 　U型管试验防止细胞直接接触 ③.是否属于转化? 　结果表现为不受DNA酶的影响，排除了由于DNA片断通过滤片经转化实现基因重组可能性。 1、普遍性转导 并发转导(cotransduction)：当两个基因相距较近, 以致能为一个噬菌体头部蛋白所包裹, 即可同时转导, 此称