发酵期末复习.doc

发酵：在生物化学或生理学上发酵是指微生物在无氧条件下，分解各种有机物质产生能量的一种方式，或者更严格地说，发酵是以有机物作为电子受体的氧化还原产能反应。 工业上所称的发酵是泛指利用生物细胞制造某些产品或净化环境的过程， 发酵工程定义：应用微生物学等相关的自然科学以及工程学原理，利用微生物等生物细胞进行酶促转化，将原料转化成产品或提供社会性服务的一门科学。 发酵工程 1、酶工程 (蛋白质工程) 2、基因工程 3、细胞工程 发酵过程得到发酵产品需要具备： 1、某种适宜的微生物 2、保证或控制微生物进行代谢的各种条件（培养基组成，温度，溶氧pH等） 3、进行微生物发酵的设备 4、提取菌体或代谢产物，精制成产品的方法和设备 发酵生产较化学生产的特点： 操作常温常压进行，操作条件温和，对设备要求相对较低 原料主要以农副产品及其加工产品 以生命体的自动调节方式进行 相对投资小，见效快，具有经济的效能的统一性 发酵工业对菌种的要求： 能在廉价原料制备的培养基上迅速生长并生成所需的代谢产物，且产量高 培养条件易于控制 生长迅速、发酵周期短 满足代谢控制的要求 抗噬菌体的杂菌的能力强 遗传性状稳定，菌种不易变异变化 生产过程泡沫少 不是病原菌，无毒害 对添加的前体物质有耐受能力 常见的工业菌种: 细菌 2、酵母菌 3、霉菌 4、放线菌 5、担子菌 6、藻类 7、基因工程菌 自然选育：不经人工处理，利用微生物的自然突变进行菌种选育的过程 诱变育种：利用各种诱变剂的物理因素和化学试剂处理微生物细胞，提高基因突变频率，再通过适当的筛选方法获得所需要的高产优质菌种的育种方法。 诱变剂：能够提高生物体突变频率的物质 诱变育种的步骤： 营养缺陷型（nutritional mutant）是指原菌株由于发生基因突变，致使合成途径中某一步骤发生缺陷，从而丧失了合成某些物质的能力，必须在培养基中外源补加该营养物质才能正常生长的突变型菌株。 基因工程的基本操作 1.目的基因的取得 2.选择载体 3.目的基因与载体DNA的体外重组 4.重组载体引入受体细胞 菌种保藏 斜面低温保藏法：酵母菌 石蜡油封保藏法：酵母菌 砂土管保藏法：细菌，霉菌，防线菌 硅胶保藏法：细菌 冷冻干燥法：细菌，防线菌 液氮超低温冻结法：细菌，真菌 菌种退化的原因 基因突变； 2、变异菌株性状分离； 3、连续传代 4、其它因素 菌种保藏不当 生长条件不满足 种子应满足的条件: 菌体的纯培养物总量适宜，以保证在发酵罐中有适当的种量 微生物菌种的生命力旺盛 菌种能保持稳定的生产性能，生理状态稳定 无杂菌和噬菌体的污染 种子培养： 固体斜面菌种培养 固体培养基扩大培养 摇床液体培养 菌龄：种子罐培养的菌丝体移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间 接种量；是指移入的种子液体积和接种后培养液体积的比例。(倒种法） 培养基是广义上讲培养基是指一切可供微生物细胞生长繁殖所需的一组营养物质和原料。同时培养基也为微生物培养提供除营养外的其它所必须的条件。 微生物获得生存的营养来源，包含水、碳源、氮源、无机盐、生长素和金属离子 发酵培养基的要求 1、培养基能够满足产物最经济的合成； 2、发酵后所形成的副产物尽可能的少； 3、培养基的原料应因地制宜，价格低廉；且性能稳定，资源丰富，便于采购运输，适合大规模储藏，能保证生产上的供应； 4、所选用的培养基应能满足总体工艺的要求，如不应该影响通气、提取、纯化及废物处理等。 碳源作用： 1、提供微生物菌种的生长繁殖所需的能源和合成菌体所必需的碳成分； 2、提供合成目的产物所必须的碳骨架 天然培养基：是利用动、植物或微生物体或其提取物制成的培养基，其化学成分还不清楚，比较复杂。 合成培养基：是用化学成分明确的物质配制而成的培养基。 前体：某些化合物加入到发酵培养基中，能直接彼微生物在生物合成过程中合成到产物物分子中去，而其自身的结构并没有多大变化，但是产物的产量却因加入前体而有较大的提高。 利用液化酶或无机酸使糊化淀粉水解成糊精和低聚糖等，使黏度大为降低，流动性增高，在工业上称为液化 糖化：以无机酸或酶为催化剂，在一定温度下使淀粉水解，将淀粉全部或部分转化为葡萄糖等可发酵性糖的过程。 淀粉水解糖的制备： 定义：以酶为催化剂，在常温常压下将淀粉水解为葡萄糖的方法。包括液化和糖化两个过程，故又称双酶水解法。 优点： 1、反应条件温和 2、副反应少，淀粉质量高 3、可在较高淀粉浓度下水解，对预料要求不高 4、糖液的质量高、营养物质较丰富 缺点： 1、水解时间长，夏天糖液容易变质 2、设备较多 酶法糖化的工艺流程 液化→糖化→灭酶→过滤→