动物细胞培养和核移植技术(第二课时)分析报告.ppt

无菌、无毒 消毒、灭菌、抗生素、定期更换培养液（清除代谢废物） 营养 合成培养基（血清、血浆） 温度和pH 36.5±0.5℃，7.2---7.4 气体 95%空气，5%CO2 知识回顾 动物组织 分散成单个细胞 细胞悬液 培养 胰蛋白酶 胶原蛋白酶 胰蛋白酶 胶原蛋白酶 原代培养 传代培养 动物细胞培养的结果：细胞群或细胞产物 获得细胞 或细胞产物 细胞的全能性 细胞数目增多 一般为植物体 培养结果 快速繁殖、培育脱毒作物等 培养目的 葡萄糖、动物血清 促生长因子 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物细胞和动物细胞培养的比较  动物细胞特点？ 分化潜能变窄：随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能变窄，这是指整体细胞而言。 细胞核仍具有全能性：细胞核，它含有保持物种遗传性所需的全套基因，而且并没有因细胞分化而丢失基因，因此高度分化细胞的细胞核仍具有全能性 根据动物细胞核仍具有全能性的特点,怎样将动物细胞的全能性表达? 利用动物细胞核移植技术 2.2.1 动物细胞培养和核移植 第二课时 二.动物细胞核移植技术和克隆动物 将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物） 分 类 胚胎细胞核移植： 体细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复全能性容易 细胞分化程度高，恢复全能性不容易 (一)、 动物细胞核移植概念： 卵细胞 Ａ母绵羊 Ｂ母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 多莉羊的培育过程 融合后的卵细胞 1997年，美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达的奶牛，年产奶量为30.8t，创造了世界奶牛产量的最高记录。目前世界各国高产牛奶场的奶牛，平均每年产量为十几吨，而我国平均水平仅有3－4t。你能想办法繁殖卢辛达的后代，使年产奶量为30.8t吗？ 能用胚胎细胞核移植吗？ （ MⅡ卵母细胞） 减数第二次分裂中期 2.结合P48图2-21，叙述克隆高产奶牛的培育过程。 将供体细胞注入去核卵母细胞 核移植 胚胎移植 供体细胞培养 整个过程用了哪些技术？ 细胞培养、核移植、胚胎移植 新生牛的性别、基因？ 性别与供体相同、基因与供体的基本相同 繁殖方式？ 无性繁殖 原理？ 动物细胞核的全能性 体细胞核移植技术 1、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出操作过程的不同点？ 多莉克隆过程的受体细胞是去核卵细胞，而高产奶牛的克隆过程的受体细胞是去核卵母细胞；多莉克隆过程是将供体细胞核注入受体细胞，而高产奶牛的克隆过程是将供体细胞注入受体细胞。 2、讨论分析上述哪一种措施更科学？并说明理由？ 卵母细胞当中的细胞周期蛋白含量、活性比卵细胞高，用它作受体更容易成功; 将供体细胞注入受体细胞，使克隆动物更像供体动物，操作也方便. 思考题 3、为什么受体细胞选取减数第二次分裂中期的卵母细胞？ 它是最大的细胞，细胞核的位置靠近第一极体，用微吸管可以将其细胞核和第一极体吸去，易操作，它发育可直接表达性状。 思考题 4、核在进行体细胞核移植之前，为何要去掉受体卵母细胞的核？ 为使核移植动物的遗传物质全部来自供体细胞（有利用价值的动物提供的细胞）。 5、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，为什么？ 10代以内的细胞保持一般保持正常二倍体的核型，未突变。 6、细胞核移植生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 不是，克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞。 思考题 供体细胞（供核） 细胞培养 体细胞 卵巢卵母细胞（MⅡ期：供质） 去核 无核卵母细胞 注入 细胞融合 重组细胞 构建重组胚胎 胚胎移植 代孕母体 生出与供体奶牛遗传基础相同的犊牛 归纳: 1.共分成两大阶段：核移植和胚胎移植 2.取MⅡ期卵母细胞作受体细胞的原因是:最大的细胞，细胞核的位置靠近第一极体，用微吸管可以将其细胞核和第一极体吸去，易操作，它发育可直接表达性状。 3.严格来说新个体有卵巢母细胞的细胞质所以有两个亲本的性状 （三）体细胞核移植技术的应用前景 阅读P49-50 1、畜牧业方面： 2、医药卫生方面： 可以加速家畜遗传改良的进程，促进优良畜群繁育。 保护濒危物种，增加其存活数量 生产医用蛋白质 组织器官的移植 3、其他领域 了解胚胎发育及衰老过程 更好追踪研究疾病的发展过程、治疗疾病 （四