系统性红斑狼疮IRF-5和TLR-9 mRNA的表达.docVIP

青岛大学 硕士学位论文 系统性红斑狼疮IRF--5和TLR--9 mRNA的表达 姓名：陈增生 申请学位级别：硕士 专业：病原生物学 指导教师：宋卫青  ??表达量是???士???，正常对照组??? 表达量是????．????咧?涞牟钜炀哂型臣蒲б庖?????；??颊逿?? ??表达量是???????，正常对照组?????表达量是???????，二 者之间的差异具有统计学意义??．????患者组???和??? 具有统计学意义??．????以赟?患者中???、??? 关，因此，???、???赡茉赟?发病中起一定作用。 硕士研究生：陈增生?≡??镅? 指导老师：宋卫青教授 关键词：系统性红斑狼疮；???；???实时荧光定量聚合酶链反 应  ? ＼??????????疷?????????????????????? ??? ??? ??? ? ??? ????篊???? ????? ?????? ? ??疭 ????，????? ? ??????? ????，? ?????? ???．?? ?? ? ???瓵? ??? ?????? ??? ? ???? ??? ????篢? ?? ??．??甌? ?? ??? ????? ? ??????? ? ?? ?? ??? ??? ??? ??? ? ?????? ?????????? ? ??．?? ???篠?；???籘??；????  ??的表达 系统性红斑狼疮???和??? 引 病高峰期在?～?岁。病程迁延累及很多器官 系统性红斑狼疮患者若未经有效治疗，其生存时间短、预后差，可伴有肾功 狼疮鼠引起的损伤则明显减轻∞?Ｓ醒д叻⑾指扇潘叵喙鼗?虻谋泶锪吭赟?鼠中 ????????，??家族是一类能对干 扰素基因表达进行调控的转录因子呻?Ｄ壳耙阎5募易宄稍笔荌?一?獻?一?。 ??????、??????和???戎疃郔?，在病毒感染后诱导?虸?  青岛大学硕士学位论文 狼疮的发病中起到了一定作用。 ??????，??是天然免疫中重要的病原体识别受 序列是以非甲基化胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸为核心的特定核苷酸序列，可调节机体 ?  ??研究对象： ?? ??免疫学异常：抗???抗体???蚩筍?固??，或抗心磷脂抗体??包括 ??： ??试剂： ???聚合酶 上海生工生物工程技术公司  青岛大学硕士学位论文 ?????公司 ???公司 ?逆转录试剂： ??? ?狧? ? ?％过硫酸铵??? ?％聚丙烯酰胺 注：?％聚丙烯酰胺由丙烯酰胺与?琋’ ??溶液??．? ????．? ??仪器 ??狝型石英亚沸高纯水蒸馏器 江苏金坛望华仪器厂 ? ?  日本日立工业株式会社 湖南仪器仪表总厂兴华仪器厂 ??籌电热三用水温箱 江苏医疗设备厂 ????公司  青岛大学硕士学位论文 ? 后的水相转入新的离心管中。不要碰到底层沉淀物。 悬浮沉淀，????，?娴臀吕胄幕???心??。 吸弃酒精，室温干燥?籰??。 加入??????硭?芙釸?。 ?觳馄浯慷取Ｓ米贤夥止夤舛燃撇舛≧?样品在?????? ? 严格按照????? 盒提供。 取???????．??胄墓苤校?尤? ??尤??? ? ???? ???。 ? ???煸群笫椅路胖???。 ? 即刻做逆转录反应。 ?  ? ? ??杆偌尤肽孀B济?? ??陨喜僮鞴?讨??步在冰盒中进行。如果标本较多，为节省材料和减少操作次 实时荧光定量??侵冈赑?反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时 始模板量之间存在线性关系，因此，可以选择该阶段进行定量分析。为了便于定量  青岛大学硕士学位论文 ■ ■ ? 巨 ? ： ?????·??··?·?··?·?’?????????·??? ? ．舯?? ?  引物序列为?????????????????????琁 ???扩增： 选择???魑D诓巍Ｃ扛霰瓯镜腎?一??蚝虶??分别在不同的毛细管中进 行扩增。??从μ逑导?卤韑。 ??预变性， ?  青岛大学硕士学位论文 引物 ?? ??模板 ? ? 表??縋?的引物序列、退火温度和检测温度 ???亩?縋?扩增 ????镄蛄形狦从????????、?覩????????，???的引物序 ???扩增： 选择???魑D诓巍Ｃ扛霰瓯镜腡?一??蚝虶??分别在不同的毛细管中 ?  样本???腃??。计算?????的表达量，计算公式胁??叫肌‘ ??统计学分析  ??目的基因扩增产物电泳 物分子量为???琈???肿恿课?????。 ? ? ?狣????；??狦??扩增产物 ? ? ? ? ? ? ? ? ?狣? ?  结果 ?? ??定量表达 ??表