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实习报告
一、实习目的及要求
掌握寄生虫完全剖检法,通过剖解采集家畜的全部寄生虫标本并进行鉴定和计数,为诊断和了解蠕虫病的流行情况,防治和研究寄生虫病提供科学依据。
二、实习器材
器材:解剖刀、解剖剪、镊子、手术剪、剪刀、标本瓶、搪瓷盘、量杯、胶头滴管、烧杯、载玻片、盖玻片、水桶,培养皿、鸡笼、饮水桶、饲料桶、托盘、塑料袋若干、塑料薄膜、显微镜、脸盆、挑虫针、广口瓶、玻璃棒、麦氏计数器、量筒。
试剂:生理盐水、酒精(70%、80%、90%、95%、100%)1号药(地克珠利溶液),2号药(盐酸氨丙啉磺胺喹噁啉钠可溶性粉)、消化液(浓盐酸0.7ml,胃蛋白酶0.5-1g,蒸馏水100ml)。
三、实习内容
山羊的剖检
在对山羊剖解前,对其体表应作认真检查和外寄生虫的采集工作。观察体表的被毛和皮肤有无瘢痕、结痂、初学、皲裂、肥厚等病变。
看到有体外寄生虫时(虱、虱蝇、蜱、螨、皮蝇幼虫等),用镊子轻轻夹取放入标本瓶内,将虫体进行饥饿处理,以达到制作标本的要求。虱卵应连毛取下防御瓶内或保存液内保存。在皮肤患部的干硬痂皮处用小刀刮取病部与健康皮肤交界处的皮屑,至轻微出血为止,将此皮屑放在空瓶内或保存液内保存。在毛囊内,皮下形成米粒大小的结节,可将结节切开取其内容物涂片镜检,放在70%酒精内固定保存。
从山羊的肛门处取出少量粪便进行虫卵检查、计数,初步确定该畜体内寄生虫的寄生情况,对以后寻找虫体时提供帮助。
利用麦氏计数器计算粪便中虫卵的类型和数量。取2g山羊粪便,放入小烧杯内,加入饱和食盐水58ml,用玻璃棒将粪球碾碎,时之成为均匀的粪液。用胶头滴管吸取粪液注入麦氏计数室内,放到显微镜下,静置1-2分钟。在显微镜下1cm2内数虫卵总数,求出两个刻度室内虫卵的平均数,乘以200即为每克粪便中的虫卵数。
对山羊进行颈静脉的打空气针致死。将山羊的躯干、脖子和四肢的皮肤一起剥下,观察身体各部淋巴结和皮下组织有无虫体寄生。头部从枕骨后方切下,首先检查头部各个部位和感觉器官。然后鼻中隔的坐侧约0.3cm处的矢状面纵向锯开头骨,撬开鼻中隔进行检查。检查鼻腔鼻窦是否有虫体,然后再水肿冲洗,沉淀后检查沉淀物,看是否有寄生虫。
打开脑腔和脊髓管后先用肉眼观察有无啕蚴,羊鼻蝇蛆寄生。再切成薄片压薄镜检,检查有无微丝蚴寄生。肉眼观察眼球,再将眼结膜及球结膜在水肿刮取表层,水洗沉淀后检查沉淀物,嘴鸥剖开眼球,将眼房水收集在平皿内,在放大镜下观察是否有丝虫的幼虫、囊尾蚴、吸吮线虫寄生。检查唇、颊、牙齿间、舌肌、咽头,有无囊尾蚴、蝇蛆、 筒线虫等寄生。
(4)沿腹中线剪开山羊腹部,再向上,沿靠近胸骨的肋骨剪开,打开胸腔。在直肠和肛门处做1次结扎并剪开,剪断食管,整个取下食管、胃、脾、小肠、胰脏和大肠。小心剥离肝脏与腹腔壁的粘膜连接,一同取下肝脏和胆囊。将胃、小肠、大肠之间剪开分开放置。将食道剪开,观察内、外表面是否有美丽筒线虫及住肉孢子虫。检查胃壁外面。先剪开瘤胃,倒出内容物,检查吸附在胃黏膜上的前后盘吸虫。然后将皱胃的内容物倒入瓷盆内,将其翻过来用生理盐水充分洗净,再用生理盐水反复冲洗,最后将沉渣倒入大培养皿中检查是否有捻转血矛线虫、奥斯特线虫、马歇尔线虫等,如发现虫体,用挑虫针挑出放于70%酒精中保存。检查肠系膜血管是否有血吸虫,并将肠系膜淋巴结切开检查有无舌形虫的幼虫,注意肠系膜上是否有细颈囊尾蚴的寄生,如有,可取下放入70%酒精中保存。沿肠系膜对侧长轴剪开肠壁,从十二指肠开始,边剪开边检查,并把肠内容物接搪瓷盘内。当发现有绦虫时,应轻轻的用剪刀尖紧贴肠壁,避免剪断虫体。其次应留心前端细小的头节不可拉断或是去,要小心的刮下完整头节,如果头节牢固吸附在宿主肠壁上则须连同肠壁组织一起取下,用水洗净(不超过5min)放入70%酒精中保存。将小肠的内容物用水冲洗并沉淀,倒去上清液,用玻璃皿仔细观察是否有仰口线虫、类圆线虫等小型线虫。将大肠的内容物倒入脸盆内,翻转大肠,用水冲净,再将内容物反复冲洗、沉淀,倒去上清液,将沉渣用玻璃皿检查,看是否有毛首线虫、食道口线虫等寄生。另外应注意检查肠壁上有无栗粒大道豌豆大的结节(食道口线虫引起的结节),将采集到的虫体组织放到70%酒精中保存。在肝脏表面先检查是否有细粒棘球蚴,然后去掉胆囊,检查内部,并切开胆管,检查是否有肝片吸虫或矛形双腔吸虫的寄生。然后将肝撕成小块用清水反复冲洗至上部液体清凉为止,倒去上清液,将沉渣用培养皿检查有无虫体。胰脏的检查方法与肝脏相同,检查是否有胰阔盘吸虫。
(5)剪断气管,玻璃肺脏、心脏与胸腔的粘膜粘连,一同取下心肺。先观察肺脏表面是否有细粒棘球蚴的寄生,如有则应连同肺组织一起剪下放于酒精中。再剪开支气管及大支气管,检查是否有大型肺线虫(网尾线虫)。然后检查小支气管或细致地撕开
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