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白木香的结香机理及造香技术 xxxxxxx 白木香[ Aquilaria sinensis (Lour.) Gilg] 又称土沉香，属瑞香科沉香属植物，为我国特有的热带及亚热带常绿乔木，是我国生产名贵芳香类药材沉香的唯一植物来源。沉香含有两种主要的成分：倍半萜类化合物和色酮类化合物，其味辛、苦，性微温，能行气止痛、温中止呕、纳气平喘，是我国、日本、印度以及其他东南亚国家的传统名贵药材和名贵的天然香料。白木香是国家二级濒危保护植物，被列入自然保护联盟( IUCN)红色名录，及《濒危野生动植物种国际贸易公约》( ITES ) 附录。目前我国药用沉香基本上靠进口，价格昂贵，随着国外资源保护的实施，进口沉香出现供不应求的局面，价格不断攀升。近年来，由于生态环境破坏、人为掠夺式砍伐，导致白木香野生资源遭到严重的破坏，现仅有零星散生的残存野生植株分布于海南、广东、广西、福建以及台湾等地。我国在“七五”、“八五”期间，将沉香药材列入重点扶持发展项目，开始大力发展白木香人工种植。目前，在广东电白、云南西双版纳、海南屯昌形成了大面积的白木香种植基地。 虽然白木香种植方兴未艾，但沉香形成过程及其机制有多种说法，莫衷一是，制约了造香技术的提高。根据前人的研究成果，以下对白木香的结香机理，及目前使用的一些人工造香技术进行总结和评价，期待对白木香人工栽培产业的发展有所帮助。 1 白木香结香机理 1.1 真菌侵染诱导结香假说 自20世纪30年代开始，国外就开展了大量接菌结香研究。从沉香属植物树体的结香部位分离的真菌主要有：色二孢菌、可球二孢菌、镰刀菌、砖红镰孢、曲霉、毛霉、青霉、木霉、裂褶菌等，研究认为沉香的形成可能是由于树干损伤后被上述一种或数种真菌侵入寄生，在真菌体内酶的作用下，使木薄壁细胞贮存的淀粉发生一系列变化，形成香脂，经多年沉积而得。1976年，广东植物研究所的研究结果显示，在白木香成香过程中伴随着真菌的生长，并成功地从白木香中分离了黄绿墨耳菌，并证实该菌可大大加速结香的进程。戚树源等对黄绿墨耳菌促进白木香产生沉香的机制进行了研究，推断白木香木材组织细胞不能直接合成白木香醛等沉香倍半萜化合物，这些倍半萜类化合物的形成可能是感染的真菌对其细胞逆境代谢产物进一步代谢的结果。 1.2 物理、化学伤害诱导结香假说 一些学者认为物理、化学伤害是沉香形成的主要原因，而真菌侵染起次要作用。Rahman 等人从马来沉香木块上分离真菌并接种于树体，结果表明沉香形成是由开放性伤口引起，并非由特定活性真菌而产生。Nobuchi 等人研究粗厚沉香受到物理伤害后，在沉香形成过程中未发现任何真菌或菌丝。中国医学科学院张争等人研究发现白木香经物理伤害处理2周后，光学显微镜和扫描电镜结果显示在射线细胞和导管细胞中存在黄棕色树脂，在距离伤口表面10 mm部位形成了一薄层沉香层，在伤口附近组织中未发现真菌孢子或菌丝体。同时，分别采用火烙法和脉冲高压电击处理白木香，结果显示在无菌条件下同样能够诱导产生沉香类物质。美国明尼苏达大学的Blanchette等人的研究证实：所有对沉香属植物木质部的伤害均能够使其产生沉香类物质，而且对活细胞的伤害强度越大所形成沉香木的面积越大。如果只是钻孔，则只在创伤边缘周围形成沉香木，如果在钻孔中加入能够杀死一些树体细胞的化学物质，则能够在更大面积上形成树脂。Blanchette等人还成功筛选到了对木质部活细胞起伤害作用的化学物质，如氯化钠、亚硫酸氢钠、氯化亚铁等，这些物质能够显著增加沉香木树脂的形成量。采用气相色谱分析氯化钠处理后12个月的样品，结果显示白木香样品含所有沉香中倍半萜类成分含量为1.5% ，且达到市售中档沉香水平。林奇艺等研究证实，乙烯利、吲哚丁酸及赤霉素可促使檀香提早结香，这为化学试剂促使白木香提早结香提供了一定的理论依据。 1.3 激发子诱导结香假说 近年来，愈来愈多的实验证明激发子(elicitor) 能够激活植物的信号传递，调节植物次生代谢途径，现已成为植物次生代谢研究的热点和焦点。激发子是指那些能够激发生物积累次生代谢产物的生物因子或非生物因子，其中包括真菌及其组分、伤害、伤害信号分子茉莉酸甲酯(MeJA)等。曾有报道将激发子茉莉酸甲酯和黄绿墨耳真菌提取物用于白木香成香机制研究中，在无菌条件下，Michiho等人将茉莉酸甲酯加入至白木香悬浮细胞中，诱导产生了α-愈创木烯、α-蛇麻烯和δ-愈创木烯。α-蛇麻烯在茉莉酸甲酯诱导早期(36 h) 量相对较高，因此，其可能是由茉莉酸甲酯诱导的白木香防御类物质。愈创木烯类化合物是在茉莉酸甲酯诱导后期(7d) 产生的，它可能是沉香螺醇、枯树醇和β-沉香萜呋喃的前体化合物。何梦玲等人以白木香根悬浮培养细胞为材料，黄绿墨耳真菌提取物为真菌激发子，首次在组织培养物中成功诱导产生了2-(2-