培养细胞的观察和检测方法-1.pptVIP

培养细胞的观察检测方法 生物技术教研室 李延兰 活细胞的观察检测方法 培养细胞常用的染色方法 细胞生长状况有关指标的检测方法 细胞生物活性的有关化学检测方法 电子显微镜技术 一、活细胞的观察检测方法 肉眼观察 相差显微镜观察 肉眼观察 一般常规检查用肉眼即可观察，主要看培养液的颜色和透明度的变化。 大多数细胞适于在pH 7.2～7.4条件下生长，低于pH 6.8或高于pH 7.6对细胞有害，甚至造成细胞退化或死亡。细胞对碱性不如对酸性的变化耐受，偏酸的条件比偏碱的环境对细胞生长有利。 随细胞数量的增多、代谢加强，释放CO2增多，使pH 降低。为了维持培养基恒定的pH ，多在培养基中加入磷酸盐等缓冲剂。 羟乙基哌嗪乙硫磺酸（Hepes）：对细胞无毒性，也不起缓冲作用，主要作用是防止pH迅速变动，在开瓶通气培养或活细胞观察时能维持较恒定的pH值。 若培养瓶、瓶塞漏气， 使CO2溢出，或者由于洗刷不洁、残留碱性物，使培养液变碱发红，致使细胞难以生长，甚至死亡。 玻璃器材 常用的玻璃器材有各种规格的玻璃瓶、培养瓶、培养皿、吸管、离心管。 首次使用： 重复使用的处理步骤： 显微镜观察 相差显微镜 （phase contrast microsc