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第六章 线粒体 一、线粒体的形态结构 (一) 形态、大小与分布 1.形态 2.大小 3.分布 4.数量 二、线粒体的化学组成 (一) 线粒体的化学组成 1.蛋白质 2. 脂质 3 RNA 4 DNA 三、线粒体的功能 （一）三羧酸循环： 1. 糖酵解 在细胞质中，葡萄糖降解生成丙酮酸。 2. 三羧酸循环: 丙酮酸进入线粒体基质??在线粒体基质中,在丙酮脱氢酶体系作用下，丙酮酸进一步分解为乙酰辅?酶A。乙酰辅?酶A进入三羧酸循坏彻底氧化为CO2和H2O并释放能量。 (二) 氧化磷酸化 氧化磷酸化的分子结构基础 1.1. 电子传递链( 呼吸链) 电子传递链 近来许多试验表明NADH传出电子时，其P/O ratio 为2.5. 原来认为是3。 10除以4 6除以4 NADH 每一对电子要pump out 出膜外的质子数量有10个，而FADH则有6各。而要驱动一个ATP产生所需的质子数，最广为接受的试验数据为4个。但使用整数2.0和3.0的生化文献仍很普遍。 1.2 ATP合成酶的分子结构与组成 分布 组成: F1(偶联因子F1) F0(偶联因子F0) 1.3 电子传递和氧化磷酸化的偶联??? 氧化磷酸化： NADH和FADH2是两种还原性的电子载体，它们所携带的电子经呼吸链传给氧时, 伴有ADP磷酸化形成ATP。 ADP+Pi ATP??? ?? ????? ( 三) ATP合成酶的作用机制 1分子结构 ( 二) 自主性的局限性 1. 基因组小 2. 合成的蛋白质种类少 线粒体中合成的多肽主要有细胞色素C氧化酶3个亚基。ATP合成酶中F0的两个亚基NADH—COQ还原酶，7个亚基和细胞色素b?。 3 mt DNA复制、RNA转录和蛋白质翻译所需的许多酶和蛋白质因子都是由核DNA编码的。 五、线粒体蛋白质的合成与运输 ( 一) 合成 导肽： 由核DNA编码的构成线粒体的蛋白质前体的N末端含有识别线粒体膜上特异受体，指导蛋白质在线粒体中定位的一段氨基酸序列，称为导肽。 其特点是： （1）含丰富的带正电荷的氨基酸；（2）羟基氨基酸含量也高；（3）几乎不含带负电荷的氨基酸；（4）可形成双亲性的螺旋结构。 ?六、线粒体的增殖与起源 *  外膜? ?????????? 内膜: 膜间隙???? ? 基质?或内室???? ? （二）线粒体的超微结构 （二）线粒体酶的定位 1 亚线粒体颗粒的制备及拆离与重组 1960年，E.Racker的氧化磷酸化的重组实验： 超声波 胰蛋白酶 或尿素 重组 亚线粒体囊泡 有电子传递能力 但不能使ADP磷酸化 具备氧化磷酸化能力 2 利用抗体对内膜上的酶进行定位 分离纯化线粒体内膜上的各种成份 通过免疫学方法制备抗体 测定抗体与亚线粒体温育后特异酶蛋白的活性。 原理： 抗体与酶结合一般可抑制酶的活性 3线粒体上酶的分布 部位 标志酶 主要酶 外膜 单胺氧化酶 膜间隙 腺苷酸激酶 内膜 细胞色素氧化酶 电子传递链 ATP合成酶 基质 苹果酸脱氢酶 脂肪酸氧化酶系 三羧 酸循 环酶系（琥珀酸脱氢 酶除外）核酸和蛋白质合成酶系 线粒体呼吸链的组分 复合物Ⅰ 复合物Ⅱ 复合物Ⅲ 细胞色素C 复合物Ⅳ 辅酶Q 呼吸链的组成 呼吸链由一系列的氢传递体和电子传递体组成。包括： NADH-Q还原酶、琥珀酸-Q还原酶、细胞色素还原酶、细胞色素氧化酶。 NADH NADH-Q 还原酶 Q 细胞色素 还原酶 细胞 色素C 细胞色素 氧化酶 O2 琥珀酸-Q还原酶 FADH2 血红素 铁硫蛋白 *2.5ATP per NADH**1.5ATP per FADH Lehninger 电子传递的方向 电子传递.gif (二) 氧化磷酸化的偶联机制 （1）电子传递链在线粒体内膜呈不对称分布。有些组分不仅可以传递电子，而且可以起质子泵的作用。 （2）当电子在内膜中迂回传递时所释放的能量将质子从内膜的基质侧泵至膜间隙，从而使膜间隙的质子浓度高于基质，因而在内膜两侧形成pH