第三章蛋白质化学..doc

第三章 蛋白质化学 一、蛋白质（protein）是生命的物质基础，是有机大分子，是构成细胞的基本有机物，是生命活动的主要承担者。没有蛋白质就没有生命。氨基酸是蛋白质的基本组成单位。它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。蛋白质占人体重量的16%~20%，即一个60kg重的成年人其体内约有蛋白质9.6~12kg。人体内蛋白质的种类很多，性质、功能各异，但都是由20多种氨基酸（Amino acid）按不同比例组合而成的，并在体内不断进行代谢与更新。 1．蛋白质元素组成和氨基酸组成的特点。2．蛋白质中常见氨基酸的结构特点、分类方法, 熟记20种氨基酸的结构特点，三字母符号和单字母符号．氨基酸α-氨基参加的各种反应及用途；α-羧基参加的各种反应及其用途；α-氨基和α-羧基共同参加的反应及其用途；熟悉R基参加的一些重要反应及其用途。 ．掌握用纸层析、离子交换层析、高效液相色谱（HPLC）分离和分析氨基酸的基本原理。 ．蛋白质四级结构的含义，四级结构的主要特点，及四级缔合在结构和功能方面的优越性。利用沉淀法、凝胶过滤法、离子交换层析法、亲和层析法、快速液相层析法、PAGE法、IES法、IES双向电泳法等方法分离分析蛋白蛋的基本原理和基本步骤，测定蛋白质含量的常用方法。 二、1.甘氨酸的pK-COOH = 2.34,pK-NH2=9.6,它的pI为 A.11.94 B.7.26 C.5.97 D.3.63 E.2.34 [答案] C [评析] 氨基酸含有碱性的氨基和酸性的羧基，具有两性解离的特性。在某种pH环境中，氨基酸的酸性基团和碱性基团解离度相等，成为兼性离子。此时，氨基酸所处环境的pH值称为该氨基酸的等电点。甘氨酸的R基无解离基团，其pI的计算方法为： pI=1/2(pK-COOH+ pK-NH2)=1/2(2.34+9.6)=5.97。.测定小肽氨基酸序列的最好方法是 A.2，4-二硝基氟苯法（FDNB法） B.二甲氨基萘磺酰氯法（DNS-CL法） C.氨肽酶法 D.苯异硫氰酸法（PITC法） E.羧肽酶法 [答案] D [评析] 测定小肽氨基酸序列最好的方法是苯异硫氰酸法。此法的最大优点是苯异硫氰酸和肽链N端的氨基反应后形成苯硫氨甲酰肽（PTC-肽），然后在酸性条件下，N端的苯硫氨甲酰氨基酸（PTC-氨基酸）环化形成苯硫乙内酰脲衍生物（PTH-氨基酸）并从肽链上脱落下来，而肽链的其余部分保持完整，又可重复上述的反应。蛋白质顺序仪就是根据这一原理设计制造的。 .下列关于蛋白质结构的叙述哪些是正确的？ A.二硫键对稳定蛋白质的构象起重要作用 B.球状蛋白质在水溶液中，带电荷的氨基酸侧链趋向于排列在分子的外面 C.蛋白质的一级结构决定高级结构 D.氨基酸的疏水侧链很少埋在蛋白质分子的内部 [答案] A，B，C [评析] 蛋白质的一级结构决定高级结构。二硫键在稳定蛋白质构象方面起重要作用。带电荷的氨基酸侧链有暴露于蛋白质分子表面的趋势，而疏水侧链则有埋于蛋白质分子内部的趋势。 .一个蛋白质样品经酸水解后，能用氨基酸自动分析仪准确测定它的所有氨基酸。 [答案] 错。 [评析] 酸水解时色氨酸被破坏，羟基氨基酸部分被破坏，谷氨酰胺和天冬酰胺分别转变成谷氨酸和天冬氨酸，胱氨酸转变成半胱氨酸，且半胱氨酸与茚三酮不发生颜色反应。 .球状蛋白折叠形成疏水核心时，伴随着多肽链熵的增加。 [答案] 错。[评析] 蛋白质折叠形成疏水核心时，肽链的熵减少，环境的熵增加。KDERA Y,MATSUCHIMA A,HIROTO M. Pegylation of proteins and bioactive substances for medical and technical applications[J].Progress in Polymer Science,1998,(7):1233-1271. 14RAMESHRAJA P,HUASHAN W,ANIL G. Current aspects in pharmacology of modified hemoglobin[J].Advanced Drug Delivery Reviews,2000.185-198. 15 Veronese F M. Peptide and protein PEGylation:A review of problems and solutions[J].Biomaterials,2001,(5):405-417. 16 SAKAMOTO S,OBATAYA I,MIHARA H. Effects on amino acids substitution of hydrophobic residues on