蛋白质基础及检测技术
6.1 两性和等电点 蛋白质是由α-氨基酸通过肽键构成的高分子化合物,在蛋白质分子中存在着氨基和羧基,因此跟氨基酸相似,蛋白质也是两性物质。 等电点(isoe1ectric point,pI):当蛋白质处于某一pH值的溶液中时,蛋白质分子上所带的正、负电荷相等,净电荷为零,蛋白质为兼性离子,此时溶液的pH值称为该蛋白质的等电点(isoe1ectric point,pI)。等电点是蛋白质的特征常数,各种蛋白质有各自的等电点。 当蛋白质所处环境的pH大于pI(等电点)时,蛋白质分子带负电荷,pH小于pI时,蛋白质带正电荷,pH等于pI时,蛋白质所带净电荷为零,此时溶解度最小。 等电点检测方法:毛细管电泳法,等点聚焦电泳 6 蛋白质的理化性质 6.2 水解反应 蛋白质在酸、碱或酶的作用下发生水解反应,经过多肽,最后得到多种α-氨基酸。蛋白质水解时,应找准结构中键的“断裂点”,水解时肽键部分或全部断裂。 举例:Edman降解法测定蛋白质的氨基酸顺序,但该法一次只能降解几十个氨基酸残基,因此利用蛋白质的水解性质将蛋白质水解为一些小肽段,分别进行测序,最后进行拼接,获得蛋白质的氨基酸顺序。 6.3 胶体性质 有些蛋白质能够溶解在水里(例如鸡蛋白能溶解在水里)形成溶液。蛋白质的分子直径(1-100nm)达到了胶体微粒的大小,所以蛋白质具有胶体的性质。 在蛋白质表面有亲水基团,
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