基因工程54660.pptVIP

传统的育种方式能实现问题探讨中的转入人胰岛素的大肠杆菌吗？ 思考 1.为什么能把人的基因嫁接到细菌上？ 2.你能推测这种基因的嫁接怎么实现吗？ 根据以下几个问题自己学习并和同学讨论找出每题答案 1，基因工程最基本的工具是什么 2.基因的剪刀的全称和简称是什么？ 3.限制酶的功能特点中指出两个特定，这两个特定是指什么？ 4.基因的针线-DNA连接酶连接的是脱氧核糖与磷酸还是互补的碱基？ 5.目前基因工程常用的运载体有哪些？ 6.什么是质粒，质粒主要分布在那些细胞中？ 基因操作的工具 基因的剪刀（分子手术刀） ——限制性核酸内切酶（限制酶） 基因的针线（分子缝合针） ——DNA连接酶 ?基因的运输工具（分子运输车） ——运载体??? 3、运载体???  ①作用：将外源基因送入受体细胞。 ②举例：质粒、噬菌体和动植物病毒。 ③???具备的条件： 1.能在宿主细胞中复制并稳定保存。 2.具备多个限制酶切点，以便于与外源基因 连接。 3.具有某些标记基因，便于进行筛选。 ⑵人工合成基因法 * * 基因工程及其应用 第2节 1.不同生物的DNA在结构和组成上几乎都一样 它们都遵循相同的遗传机制，遗传物质都是DNA. 都使用一套遗传密码子。 2.应该用剪刀把需要的基因剪下来，然后用一定的 东西把它运到另一个细胞体内和该细胞的基因拼 接的一起。 基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。该技术是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。 （一）基因工程的概念 　基因操作的工具 1.基因的“剪刀”──限制性内切酶（限制酶） 　　一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将DNA 分子切断。 专一性 基因的针线：DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割 DNA连接酶：连 接磷酸和脱氧核 糖之间的化学键 标记基因，便于进行检测。 四个基本步骤： 1）提取目的基因 2）目的基因与运载体结合 3）将目的基因导入受体细胞 4）目的基因的检测和表达 （三）基因操作的基本步骤 目的基因 目的基因是人们所需要转移或改造的基因。 直接分离基因 人工合成基因 目的基因的提取方法 （三）基因操作的基本步骤 提取目的基因的方法 　用限制酶切断成许多片段 ⑴直接分离基因——鸟枪法 　　将供体生物的DNA用限制酶切割为许多片段，再用运载体将这些片段都运载到受体生物的不同细胞中去。只要有一个细胞获得了需要的目的基因并得以表达，基因工程就算成功了。　　该法最大的缺点是带有很大的盲目性，工作量大，成功率低。且不能将真核生物的基因转移到原核生物中去。 逆转录酶 mRNA为模板 单链DNA 双链DNA ①逆转录法 ②直接合成法： 蛋白质的氨基酸顺序 DNA的脱氧核苷酸顺序 游离脱氧核苷酸直接合成相应的基因。 步骤二：目的基因与运载体重组 1）用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个切口，露出黏性末端。 2）用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端。 3）将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，再加入适量DNA连接酶，形成了一个重组DNA分子（重组质粒） 目的基因与运载体的结合过程，实际上是不同来源的基因重组的过程。 （三）基因操作的基本步骤 将目的基因导入受体细胞的原理 借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。 步骤三：目的基因导入受体细胞 步骤四：目的基因的检测和表达 受体细胞是否表现出目的基因所控制的特有性状 目的基因是否表达 目的基因表达 受体细胞是否有运载体特有的标记基因所控制的特有性状 目的基因是否导入受体细胞 目的基因的检测 依据 目的 　　例：用棉铃饲喂棉铃虫，如虫吃后不出现中毒症状，说明未摄入目的基因或摄入目的基因未表达。如虫吃后中毒死亡，则说明摄入了抗虫基因并得到表达。 我国生产的部分基因工程疫苗和药物 　　许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限，其价格往往十分昂贵。 １、基因工程与