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猴头菇多糖对树突状细胞的免疫调节作用 摘要:猴头菌属多糖已被证明具有免疫调节活性。我们发现的生物活性成分由20%的HE-PS-glucan衍生品。我们使用一个调查的影响的分析成熟的HE-PS鼠树突细胞(DCs),来自大鼠骨髓造血细胞(BMHCs)。结果显示治疗50g/mL HE-PS改变了形态并行DCs的一种活动形式重要的两个褶皱增加MHC II类和CD80/86表面抗原相比控制。此外,内吞作用的DCs在同一剂量明显减。IL-12,IFN -IL - 10细胞因子分泌明显增加了2.7、1.5和1.6倍,分别比较对照组治疗了HE-PS 50 g / mL。本研究使用了动力分析平台HE-PS导致DCs激活和调节TH1免疫反应。因此,HE-PS潜力免疫增强剂,可以保健食品行业的进一步发展。 关键词:猴头菌属;erinaceus生物活性多糖-Glucan;树突细胞;TH1免疫反应;功能性食品 1、介绍 蘑菇是几千年来广泛用于中药和也被作为一种食物来源。在中国,印度,日本,其他亚洲国家，甚至美国和欧洲，蘑菇种类数量被用作医学或功能食品治疗疾病,分析了药用蘑菇,发现含有几个生物活性成分,如多糖、生物活性蛋白质,糖蛋白、蛋白聚糖,可以作为抗氧化剂或抗肿瘤的因素。 猴头菌属是一个物种的药用蘑菇被用来作为中国传统药用真菌多年。在日本,中国,美国和其他国家，猴头,它也被称为山伏茸大胡子刺猬蘑菇,狮子的鬃毛蘑菇,或胡须齿真菌。用于治疗胃溃疡、慢性胃炎等消化疾病。先前的研究已经报道说果期的身体和真菌菌丝含有生物活性多糖,具有多种药理活性,包括增强免疫系统的抗肿瘤活性,降糖活性,抗炎,抗菌活性属性,抗老化性能和加速伤口愈合。特定的化合物,如棕榈酸与欧亚刺猬可能起抗氧化作用以及调节血脂水平和降低血糖水平的能力。 许多报道已经证明了免疫调节多糖的影响[6-8、14-16]。多糖大于1×10kDa,已被证明增加小鼠T细胞和巨噬细胞的水平[15]。他们也是报道从人类诱导人类DCs的成熟外周血。DCs是专业的抗原递呈细胞，能与多糖桥先天和适应性免疫。激活后,抗原处理并提出了高水平表达的和主要组织相容性复合体(MHC)分子。DCs还分泌各种细胞因子和趋化因子调节T细胞和B淋巴细胞反应。此外,DCs的重要介质外周免疫耐受和保存免疫内稳态。 在目前的研究中,我们使用的小鼠试验平台测量多糖的生物活性。 主要的目标是评估的潜力,通过分析多糖的免疫刺激性影响他们的直流形态学、细胞因子的生产和内吞作用。 2．材料和方法 2．1 老鼠 在实验之前,老鼠基底的饮食与免费的水和饲料一周进行调整环境。动物的房间被保持在25?C和60%湿度12 h光明与黑暗周期。所有动物治疗被在台湾技术东科技大学的动物伦理委员会国立屏批准。 2．2 2．3HE-PS组成的 提取的总糖含量测定比色法之前的描述。使用3分析了总还原糖,5-dinitro-salicylic酸与前面描述的方法。样品溶液的吸光度是阅读在540海里。葡萄糖被用作标准为总糖含量和还原糖含量分析。苯胺蓝分析是用来确定浓度的1、3 d葡聚糖像前面所述提取的一些修改。海带多糖(美国Sigma),使用三维葡聚糖标准。蛋白质的浓度由布拉德福德方法使用蛋白质测定工具包(美国Bio-Rad)根据制造商的指示。最后,的内毒素含量提取测定的显色鲎amedocyte溶解产物工具包(Associates美国的科德角)最大灵敏度水平为0.25欧盟/毫升。 2、4测定单糖组成、性质和分子HE-PS重量(Mw)的化合物 识别和量化HE-PS的单糖由气相色谱(GC)。首先,多糖(6毫克)三氟乙酸水解与0.3毫升的2米(TFA),享年121岁?C 90分钟。水解产品然后减少NaBH4(2 g)。其次是中和稀醋酸和蒸发40岁?C在1毫克肌醇作为内部标准和1米摘要在30(0.1毫升)?C与搅拌90分钟。降低产品(alditols)乙酰化和干进行GC分析。通过使用这种方法,传统转化为单糖alditol醋酸盐和1毫克GC分析了肌醇作为内部标准。执行GC在惠普惠普5890系列二世GC系统(德、美国)配备了db - 225列(30米×0.25毫米×0.15米),柱的温度保持在220年?C 2分钟,然后增加到250?C 3分钟,化合物分离1毫升/分钟的速度为30分钟。 高效液相色谱法测定多糖的Mw分析。原油多糖溶解在0.05 M氯化钠(10毫克/毫升),过滤0.45膜,然后应用20 L整除的高效液相色谱系统(L - 2490,日立、日本东京)。该系统配备了一个TSK-GEL G3000PWXL列(7.8毫米×30厘米),并保持在一个温度为40?c的多糖与0.05 eluted氯化钠溶液0.6毫升/分钟的流量和检测到 示差折光检测器(清除)