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FDPD二聚体FPD二聚体
D-二聚体和FDP的检测及临床意义
D-二聚体和 FDP
D-二聚体是纤维蛋白单体经活化因子FXⅢa交联形成纤维蛋白后,再经纤溶酶水解所产生的特异性降解产物,其水平的升高表明存在继发性纤溶亢进(如DIC);FDP反映血循环中纤维蛋白和/或纤维蛋白原,在纤溶酶作用下所产生的多种碎片的含量,其水平的升高表明机体纤溶活性亢进(原发性纤溶和继发性纤溶)。D-二聚体和FDP的检测对于诊治凝血-纤溶系统疾病、溶血栓治疗的监测等方面有着重要的意义。
FDP 和D-二聚体检测
D-二聚体和FDP在临床检测过程中受到诸多因素的影响,常会造成假阳性或假阴性的结果,而降低临床应用的敏感性和特异性,直接影响临床的诊断。
1、使D-二聚体和FDP升高的因素
生理性因素:年龄增长、妊娠、剧烈运动、月经期妇女、高脂饮食,酗酒者纤溶活性增高。
病理性因素:在脑血管卒中、溶血栓治疗、严重感染、脓毒血症、组织坏疽、先兆子痫、甲状腺功能减低、重症肝病、结节病等情况下,常有凝血和纤溶系统的激活,也可见D-二聚体和FDP升高。
药物:尿激酶(UK)、链激酶(SK)、葡激酶(SaK)和基因重组组织型纤溶酶原激活物(rt-PA)。
肝素、某些抗高血压药物(如氯沙坦)可以降低高血压病患者的PAI-1活性,升高t-PA活性。
2、使D-二聚体和FDP降低的因素
药物:肝素、某些抗高血压药物(如氯沙坦)可以降低高血压病患者的PAI-1活性,升高t-PA活性。
末梢陈旧血栓、上肢/锁下血栓、少数儿童VTE,低纤溶活性等。
3、 标本采集
标本必须按照规定方法采集(参照NCCLS H2l-A2文件,1991),以防凝血系统和纤溶系统的激活而影响检测结果。
(1)采血方法:采血时,一般要在病人空腹、安静状态下进行,以早晨07:00至09:00最为适宜,因为生物钟时间对检测指标有一定的影响。对于多次反复采血的病人最好在同一固定时间和同一条件下采血。
采血时扎带压力要小,束缚时间要小于5min,采血人员应技术熟练,一针见血,防止组织过多损伤,采完血后应拔掉针头,将血液沿管壁缓缓注入试管,避免产生气泡,因为泡沫的产生可使纤维蛋白原变性。血液和抗凝剂混匀时应轻轻颠倒,避免用力振荡而破坏凝血蛋白。
(2)标本的贮存:血液要求采集于塑料或硅化试管中,全血贮存在4~10℃不超过2h,在1h内分离血浆。大多数凝血试验采用乏血小板血浆,3000rpm离心10min分离,以去除全血中的血小板第3因子(PF3)、第4因子(PF4)和某些凝血因子。
4、 抗凝剂的影响
静脉采血需用含0.109mol/L枸橼酸钠抗凝管采集,枸橼酸钠与血液标本比例为1:9,抗凝剂的量要准确。如抗凝剂量减少会使D-二聚体值偏高,抗凝剂量增多会使D-二聚体值偏低,失去检测的准确性。采血完毕后及时将血液与抗凝剂轻轻混匀,以免血液凝固,但应避免剧烈震荡。
5、 检测试剂盒和仪器的影响
由于方法学上的原因,不同试剂测定同一份血浆或全血中的D-二聚体和FDP浓度往往不具有可比性。原因包括抗体特异性差异,纤维蛋白降解片段长短不一,针对不同片段制备的单克隆抗体也不一样,抗体对同一份血浆中不同片段的结合能力也不同;比浊法测定还受到乳胶颗粒特征的影响,颗粒大小不等在聚集时吸光特性也不一样,因此不同D-二聚体和FDP试剂的差异是不可避免的。由于每种试剂所用抗体不同,因此相应的校准物也不同,目前校准物包括交联纤维蛋白凝块被消化处理后的血浆,DIC患者的混合血浆,或者高分子量纤维蛋白寡聚体制品等。制造商只选择适合其产品的校准物,但是一种定值校准物通常不会适用于另一品牌的试剂,因此,D-二聚体测定没有参考标准,方法之间校正的可能性也很低。
由于不同厂家试剂成分的不同,在试剂检测的线性范围、参考值范围等性能方面有很大差异。临床检验室应根据临床诊断目的及所使用的检测试剂和仪器,建立自己实验室的参考范围,表2显示常见厂家D-二聚体试剂盒的性能比较。
D-二聚体的报告单位,通常包括纤维蛋白原等量单位(FEU)和D-二聚体单位(DDU)两种形式。FEU是将D-二聚体的量用降解前纤维蛋白原分子的量来表示,一般情况下,用FEU表达的D-二聚体的量相当于用DDU表达的1.7~2.2倍。在D-二聚体报告方式中还包括ng/ml、μg/ml和mg/l等形式,通常应该直接采用制造商提供的单位,不建议进行形式和量纲的转换。
由于检测D-二聚体和FDP需要用到的是血浆样本,与凝血常规测定项目(PT、APTT、FIB、TT)使用同样的样本,因此,国际上D-二聚体和FDP测定基本都是在全自动血凝仪上进行。
6、 检测方法
目前,D-二聚体和FDP的检测,已发展了多种检测方法,每种方法各有其优、缺点,由于检测方法的
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