基因治疗技术与应用·__培训课件.pptVIP

* 本病最特征的临床表现为血LDL-C水平增高、黄色瘤、角膜弓和早发性冠心病。 血浆LDL-C水平增高促使胆固醇在身体其他组织沉着。沉积在肌腱者称肌腱黄色瘤，以跟腱和手部伸肌腱多见，为FH的特有表现；在肘部和膝下也易形成结节状黄色瘤；眼睑处可形成扁平状黄色瘤。随着年龄的增长，肌腱黄色瘤更常见。 胆固醇在角膜浸润则形成角膜弓。纯合子在10岁以前即可出现，杂合子多在30岁后出现。角膜弓也可见于其他类型的高脂血症。 * 　ASD是指隔开左右心房（心脏上部的两个腔室）的间隔出现了缺损。这种心脏缺损会导致左心房的富氧血液流入右心房而不是正常流入左心室。很多ASD患者几乎不会表现出什么症状。 ????VSD是指隔离左右心室（心脏下部的两个腔室）的间隔出现了缺损。这种心脏缺损会导致左心室的富氧血液流入右心室而不是正常流入主动脉。 * 如将白细胞介素-2导入肿瘤病人体内，提高病人IL-2的水平，激活体内免疫系统的抗肿瘤活性，达到防治肿瘤复发的目的。 * 一类为基因修正（gene correction）和基因置换（gene replacement），即将缺陷基因的异常序列进行矫正，对缺陷基因精确地原位修复，不涉及基因组的其他任何改变。通过同源重组（homologous recombination）即基因打靶 基因治疗（gene targetting）技术将外源正常的基因在特定的部位进行重组，从而使缺陷基因在原位特异性修复。另一类为基因增强（gene augmentation）和基因失活（gene inactivation），是不去除异常基因，而通过导入外源基因使其表达正常产物，从而补偿缺陷基因等的功能；或特异封闭某些基因的翻译或转录，以达到抑制某些异常基因表达。 按靶细胞 又可分为生殖细胞（germ-line cell）基因治疗和体细胞（somatic cell）基因治疗。广义的生殖细胞基因治疗以精子，卵子和早期胚胎细胞作为治疗对象。由于当前基因治疗技术还不成熟，以及涉及一系列伦理学问题，生殖细胞基因治疗仍属禁区。在现有的条件下，基因治疗仅限于体细胞。 给药途径 ①ex vivo 途径：这是指将含外源基因的载体在体外导入人体自身或异体细胞（或异种细胞），经体外细胞扩增后，输回人体。ex vivo基因转移途径比较经典、安全，而且效果较易控制，但是步骤多、技术复杂、难度大，不容易推广； ②in vivo 途径：这是将外源基因装配于特定的真核细胞表达载体，直接导入体内。这种载体可以是病毒型或非病毒性，甚至是裸DNA。in vivo基因转移途径操作简便，容易推广，但目前尚未成熟，存在疗效持续时间短，免疫排斥及安全性等一系列问题。 * 由于当前基因治疗技术还不成熟，以及涉及一些伦理学问题，生殖细胞基因治疗仍被禁止。在现有的条件下，基因治疗仅限于体细胞。 * 3.1.2 恶性肿瘤的基因治疗 一、抑制和杀伤肿瘤细胞 自杀基因疗法 （TK、CD基因） 抑制癌基因的表达 （反义RNA、核酶、细胞内抗体） 恢复抑癌基因的功能 （p53、Rb基因） 抗肿瘤血管形成 二、肿瘤细胞的基因“修饰” 导入细胞因子基因 导入MHC基因和共刺激分子基因 三、调节和增强机体的免疫功能 细胞因子基因导入免疫细胞 基因修饰的树突状细胞 分泌免疫毒素的T淋巴细胞 肿瘤DNA疫苗 3.1.3 病毒性疾病的基因治疗 针对病毒: 诱导对病毒RNA的降解 抑制病毒与宿主细胞结合 干扰病毒基因组的转录起始和调控 抑制病毒基因组的复制和蛋白质合成 RNA干扰技术 3.2.1 中国的基因治疗 1991.12 血友病B，凝血因子IX，逆转录病毒载体，导入患者自身皮肤成纤维细胞。 恶性脑胶质瘤，TK基因 非小细胞肺癌，逆转录病毒，IL-2 血友病B的基因治疗 逆转录病毒载体 +FⅨ cDNA 重组体 5` LTR FⅨ neo SV PSO LTR 3` ①导入仓鼠细胞（CHO ）→FⅨ表达； ②导入乙型血友病患者皮肤成纤维细胞（体外培养）→FⅨ表达； ③91年，导入乙型血友病患者皮肤成纤维细胞（体外培养）→回植病人皮下→FⅨ基因表达，FⅨ基表达水平达正常人的5%。 3.2.2 基因治疗药物 2003年10月16日，拥有自主知识产权的重组人p53腺病毒注射液(Gendicine)获得国家食品药品监督管理局批准的新药证书。 这是世界上第一个获得正式批准的基因治疗药物。 3.3 基因治疗存在的问题 1999年“杰辛格”基因疗法失败. 18岁的泽西·杰辛格患有鸟氨酸氨甲酰基转移酶(OTC)缺失症，接受基因疗法后意外死亡。 合理性、困难性 安全性 3.4 现状及