精子功能检测的进展__培训课件.pptxVIP

精子功能检测的进展南方医科大学华银医学检验中心 胡勇华内 容一、精子功能检测的概要和意义二、精液常规显微镜检查三、精子获能和精子受精功能检测四、精子核成熟度和精子染色体非整倍性检测五、精子凋亡检测六、精子功能流式细胞仪检测的发展七、总结及展望9.男子生殖核的形成5.精卵识别7.释放蛋白水解酶6.顶体反应2.活力8.穿透透明带3.形态4.精子在女子生殖道获能及运送 一、精子功能检测的概要和意义1.数量二、精液常规显微镜检查WHO检查指标：1、精液外观2、精液量3、酸碱度4、液化时间5、粘稠度6、精子聚集与凝集7、精子浓度8、精子活动率9、圆细胞浓度及分类10、精子形态学染色分析精液常规检查中容易忽略的几个问题：1、精液标本的采集方式和患者的情绪会影响样本采集的完整性。2、如果比较两次的精液常规检查结果，必须考虑相同的禁欲时间和患者相同的状态。3、粘稠度高不等同于液化异常。不液化的精液标本呈现非均质粘稠，而粘稠度高的精液标本所呈现的是均质性粘性，并且其粘稠度不随时间而变化。4、精子总数可以衡量睾丸产生精子的能力和男性输精管道畅通的程度，精子浓度受精囊腺和前列腺分泌液量的影响（Eliasson et al.,1975），不是衡量睾丸功能的特异性指标。5、圆细胞浓度检测和分类的重要性 精液中的白细胞和不成熟的生精细胞统称为圆细胞。正常精液中，有90%的圆细胞为未成熟生精细胞，并且数量很少。 临床检测圆细胞浓度超过1x106/ml时，就需要进一步通过染色进行分类，并且准确测定它们的浓度，这对诊断不育病因十分重要。 常用的染色方法有：区分不成熟生精细胞可以用瑞-吉染色；区分白细胞可以用白细胞过氧化物酶染色和全白细胞（CD45）免疫细胞化学染色。精液中脱落生精细胞的形态示意图（曹兴午，精液生精细胞检查与临床意义，中华检验医学杂志2006年10月第29卷第10期）白细胞过氧化物酶染色的白细胞示意图（棕色）全白细胞（CD45）免疫细胞化学染色结果示意图研究样本情况睾丸活检病理结果精液脱落细胞学检查结果15例自愿者（均为妻子怀孕待产）可见各级生精细胞及精子1、能见少量各级生精细胞及大量精子者1例，占6.7%；2、见到少量初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和大量精子者3例，占20%；3、见到少量次级精母细胞、精子细胞和大量精子者10例，占66.7%；4、仅见少量精子细胞和大量精子者1例，占6.7%。12例少精子症者可见少量精原细胞、精母细胞、次级精母细胞，有少数晚期精子细胞1、检查出包括精原细胞在内的大量各级生精细胞2例，占16.7%；2、有大量初级精母细胞、次级精母细胞、少量晚期精子细胞和精子8例，占66.7%；3、有大量精子细胞和极少量精子2例，占16.7%。10例原发性睾丸功能障碍1、仅见精原细胞、支持细胞6例；2、睾丸曲细精管生精细胞完全缺失，生精上皮仅支持细胞组成者4例。1、见有少量精原细胞、支持细胞及生殖道上皮细胞6例；2、见有支持细胞、生殖道上皮细胞4例。结论：精液脱落细胞学检查与睾丸活检的病理结果具有一致性。（黄宇峰，精液脱落细胞的研究与临床应用，临床检验杂志1996年第14卷第1期） 目前还没有来自有生育力男性精液中过氧化物酶阳性细胞的参考范围，WHO第四版精液分析手册中确定的精液白细胞症临床诊断标准为1x106/ml。 Cooper 通过研究证实现有的过氧化物酶染色方法很难精确到1x106/ml这个标准，所以白细胞精液症临界值的确定一直存在诸多分歧，因此临床迫切需要建立新的标准和更可靠快速的检测方法学。（Cooper, Improving Precision in the Assessment of Round Cell Numbers in Human Semen, 2010）6、精子形体学分析必须按照严格标准进行评估 所谓严格标准，是指严格评估精子形态（细分为头部、颈部和中段以及尾部）和过多残留胞浆，只有以上标准都正常的精子才认为是正常的。 使用严格标准，精子头部形状比大小更重要。精子头部形态异常往往和DNA碎片的增加（Gandini et al., 1988）、染色质结构异常（Lee et al., 1996）、不成熟染色质（Dadoume et al., 1988）和非整倍体（Devillard et al., 2002）相关。卷尾可能提示附睾功能障碍（Pelfrey et al., 1982）。过多的残留胞浆与精子的发育相关，并有研究显示，活性氧( ROS) 与过量的残留胞浆小滴呈正相关（Esfandiari N et al., 2003）。精子形态学分类标准(Kruger menkfeld) 精液显微镜检查技术的发展：1、计算机辅助精液常规分析系统（CASA） 由相差显微镜、恒温装置、专用记数板、摄像系统、